化學鍵合固定相色譜儀的類型與特點

采用化學鍵合固定相的高效液相色譜儀稱為化學鍵合固定相色譜儀（簡稱鍵合相色譜儀），分反相鍵合相色譜儀、正相鍵合相色譜儀和離子鍵合相色譜儀。化學鍵合固定相的研制成功和應用是高效液相色譜儀發展的一個里程碑，在高效液相色譜儀中占有很重要的地位。

一、類型：

1、反相鍵合相色譜儀：

（1）固定相：

采用極性較小的鍵合固定相，如硅膠－C18 H37 和硅膠－苯基等。

（2）流動相：

1）采用極性較強的溶劑，如甲醇、乙腈－水、水和無機鹽的緩沖溶液等為流動相，多用于分離多環芳烴等低極性化合物。

2）采用含一定比例的甲醇或乙腈的水溶液為流動相，用于分離極性化合物。

3）采用水和無機鹽的緩沖液為流動相，用于分離易離解的化合物，如有機酸、有機堿和酚類等。

（3）分離機理：

把非極性的烷基鍵合相看作一層鍵合在硅膠表面上的十八烷基的「分子毛"，這種「分子毛"有較強疏水特性。

2、正相鍵合相色譜儀：

（1）固定相：

將極性的有機基團鍵合在硅膠表面。

（2）流動相：

以非極性或極性小的溶劑（如烴類）中加入適量的極性溶劑（如氯仿、醇和乙腈等）為流動相。

分配比 k 隨著組分極性的增加而增大，隨著流動相極性增加而降低。

用于分離極性化合物，特別適合異構體和極性不同的化合物的分離。

3、離子鍵合相色譜儀：

（1）固定相：

以表面多孔型和全多孔微粒型硅膠為基質，化學鍵合各種離子交換基團，如－SO3 H、－CH2NH2、－COOH 和－CH2N（CH3）等。

（2）流動相：

一般采用緩沖溶液。

（3）分離機理：

與離子交換色譜儀類同。

二、特點：

1、優點：

（1）通過改變流動相的組成和種類，可有效地分離各種類型的化合物（非極性、極性和離子型）。

（2）鍵合固定相非常穩定，在使用中不易流失，適用于梯度洗脫，特別適合分離容量因子 k 值范圍寬的樣品。

2、缺點：

不能用于酸、堿度過大或存在氧化劑的緩沖溶液作流動相的體系。