化學鍵合相色譜儀鍵合固定相的制備方法

化學鍵合相色譜儀鍵合固定相是利用化學反應將有機分子通過共價鍵鍵合在載體表面上，形成均一、牢固的單分子液膜而構成的固定相。

一、鍵合固定相的分類：

載體幾乎都用硅膠。

1、疏水基團：不同鏈長的烷烴（C₈ 和 C₁₈）和苯基等。

2、極性基團：氨丙基、氰乙基、醚和醇等。

3、離子交換基團：作為陰離子交換基團的胺基、季鍍鹽和作為陽離子交換基團的磺酸等。

二、鍵合固定相的制備：

1、硅氧碳鍵型鍵合固定相（硅酸酯型）（≡Si－O－C）：

最先用于液相色譜儀的健合固定相。

用醇與硅醇基發生酯化反應制備。

此類鍵合固定相的有機表面是一些單體，具有良好的傳質特性。但這些酯化過的硅膠易水解且受熱不穩定，因此僅適用于不含水或醇的流動相。

2、硅氧硅碳鍵型鍵合固定相（≡Si－O－Si－C）：

目前應用最廣泛的鍵合固定相。

將硅膠與有機氯硅烷或烷氧基硅烷反應制備。

此類鍵合固定相具有相當的耐熱性和化學穩定性，在 PH=2～8.5 范圍內對水穩定，有機分子與載體間的結合牢固，固定相不易流失。

例：十八烷基硅烷鍵合固定相（簡稱 ODS 或 C₁₈）是最常用的非極性鍵合固定相，用于反相色譜，在 70℃ 以下和 PH= 2～8 范圍內可正常工作。

3、硅碳鍵型鍵合固定相（≡Si－C）：

將硅膠表面氯化后，使 Si-Cl 鍵轉化為 Si－C 鍵，有機基團直接鍵合在硅膠表面上。此反應不方便。

當使用水溶液時，必須限制 PH=4～8 范圍內。

4、硅氮鍵型鍵合固定相（≡Si－N）：

將硅膠表面的羥基先轉化成鹵素（氯化），再與各種有機胺反應，可得到各種不同極性基因的鍵合固定相。

可用非極性或強極性的溶劑作為流動相。