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  • 發布時間:2020-05-07 15:30 原文鏈接: 醫學實驗室常規離心技術功能需求

    通用實驗室離心機可能會深入到每一個技術相關實驗室.是一個潛在發展的市場.應當引起裝備管理方面的高度重視。在明確實驗室的技術定位、主次技術需求及相應離心方法的前提下,轉頭形式、zui大rcf、rpm、樣品量等是選擇離心技術的基本參數.要在此基礎上考慮離心機的選型、主要功能及兼顧功能的配置

    2.1 醫學實驗室常規離心技術功能需求

    2.1.1 RNA 離心制備

    培養細胞經低速離心f水平轉頭.300xg)完成細胞分離、裂解后。加RNA沉淀提取液,于4~C,10000~12000xgf角轉頭.微量1.5/2.0 ml Eppendorf管。或≥15 ml、50 ml管)分步提取;組織樣本需先施勻漿預處理

    2.1.2 DNA離心制備

    水平轉頭.2 000xg左右(1.5/2.0 ml Eppendorf管。15 HIl、50 HIl錐底管或更大體積);再經12000~27000xg。制備質粒DNA:角轉頭,250 ml或500ml/瓶。5000~6000Xg;15~50 ml/管,12000~27000xg:4~C或特定溫度。

    2.1.3 載體表達蛋白分離

    角轉頭。250~500 ml/瓶,4000xg;15~50 ml錐底管,3000xg;角轉頭,5O Inl管/瓶,27000~g;4~C。

    2.1.4 細胞純化和亞細胞器分離

    用差速離心法分離細胞器和大小差別懸殊的細胞。由低速分步到高速離心.細胞器的沉降順序是細胞核、線粒體、溶酶體、過氧化酶體、內質網、高爾基體、核蛋白體,所有過程控溫4℃ 。收集細胞:水平轉頭,850~1850xg。優選錐形底管;分離細胞核和細胞質,3300xg;核提取,25000xg。進一步純化分離將聯用超速離心 密度梯度速率沉降法分離密度相近而大小不等的細胞或細胞器 采用合適的密度梯度介質。水平轉頭100~900xg。等密度梯度法分離細胞器.10000~30000xg

    2.1.5 細胞學涂片離心

    除專用細胞涂片離心機外.在個別實驗室離心機上可配置細胞學涂片離心轉頭.實現一次1>4片離心。據細胞學特性,rcf控制在50~1000~g。選購時.需注意離心容器的樣品處理量是否滿足實驗目的。

    2.1.6 離心超濾、濃縮、抽提

    配合市售離心過濾濃縮管f1.5~8O ml,Coming,Millipore,Spectrum等)或樣品抽提容器使用。采用角轉頭或水平轉頭 角轉頭可使超濾膜與離心力不成直角而避免濃度極化:1000~12000xg不等.可參考所購容器的使用說明

    2.1.7 微孔板離心

    酶標板、TC板、PCR板以及樣品抽提純化板的離心。在通用離心機可通過在大容量水平轉頭上配置微孔板吊架(rcf一般將低于轉頭的額定值1或選用微板專用離心轉頭實現.1O00xg左右 每個吊架可放1~4塊標準96孑L板或更多,也有可兼做載玻片的離心適配器

     


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