1.內鏡（胃鏡）檢查
可對十二指腸黏膜直接觀察、攝像，還可在直視下取活組織作病理學檢查。是診斷十二指腸潰瘍的最主要方法。
2.X線鋇餐檢查
對心腦血管疾病或因其他原因而無法耐受內鏡（胃鏡）檢查的患者可進行鋇餐檢查，可發現龕影；正面觀龕影呈圓形或橢圓形，邊緣整齊。因潰瘍周圍的炎性水腫而形成環形透亮區。
3.HP檢測
4.胃液分析
正常男性和女性的基礎酸排出量（BAO）平均分別為2.5和1.3mmol/h，（0～6mmol/h），男性和女性十二指腸潰瘍患者的BAO平均分別為5.0和3.0mmol/h。當BAO>10mmol/h，常提示胃泌素瘤的可能。五肽胃泌素按6μg/kg注射后，最大酸排出量（MAO），十二指腸潰瘍者常超過40mmol/h，對潰瘍病的診斷和鑒別診斷有參考價值。