哺乳類細胞DNA合成可分為兩條途徑，①從頭(de novo)合成途徑，利用磷酸核糖焦磷酸和尿嘧啶，可被氨基蝶呤(A)阻斷；②補救(salvag-e)合成途徑，在次黃嘌呤磷酸核糖轉化酶( HGPRT)存在下利用次黃嘌呤(H)和胸腺嘧啶(T)。
單克隆抗體技術的流程為：脾細胞和骨髓瘤細胞在聚乙二醇(PEG)作用下發生細胞融合；加入HAT選擇培養基(含H、A和T)后，未融合的骨髓瘤細胞因其從頭合成途徑被氨基蝶呤阻斷，而又缺乏HGPRT不能利用補救途徑合成DNA，從而死亡；未融合的脾細胞難以在體外培養而死亡；融合細胞因從脾細胞獲得HGPRT，故可在HAT選擇培養基中存活和增殖。