二、實驗材料
1%瓊脂（生理鹽水配制）管，每管約4ml
載玻片
打孔器及打孔模板
微量加樣器及塑料吸頭
抗原：0.5μg/ml 牛血清白蛋白（BSA）、0.5μg/ml 人血清白蛋白（HSA）
抗體：兔抗人血清白蛋白加兔抗牛血清白蛋白
濕盒
三、實驗方法
1．將已溶化的1%鹽水瓊脂管放58°C -60°C 水浴箱中平衡溫度備用。
2．將載玻片置于水平桌面上，傾注已溶化瓊脂3.5-4ml，使成厚度約1.5mm 瓊脂板（注意：傾注速度不要過快，以免瓊脂溢出載玻片；傾注過程要連續以保證瓊脂板均勻、平滑）。
3．瓊脂凝固后，將打孔模板置于瓊脂板下，然后用打孔器打孔，根據不同需要可制成三角型、方陣型或梅花型。本次試驗采用三角型（如圖），即每三個孔組成一個三角型。（因本次實驗所制備的瓊脂板均以載玻片為底板，故根據其大小只能采用三角型且每一瓊脂板也只能打孔兩組。否則，如采用方陣型或梅花型則因瓊脂板邊緣瓊脂厚度不夠而使周邊各孔所加抗原或抗體量不足或溢出，而制成三角型三組，因各孔相距過近，抗原、抗體相互滲透擴散將影響結果的判斷）。
4．如圖2 所示，用微量加樣器加10μl 抗體于各組一孔中，每組所余兩孔各按抗原1、2 為一組，3、4 為二組，5、6 為三組，分別各加入10μl。注意每加一樣品均需更換吸頭，以防止交叉污染，影響實驗結果。
5．作好標記，放濕盒中，置37°C 溫箱，24 小時后觀察結果。
四、實驗結果
1．融合性沉淀孤，說明兩孔中抗原相同，為同一性反應（圖2-1）。
2．兩沉淀線獨自形成并形成交叉，說明兩孔中的抗原完全不同，為非同一性反應（圖2-2）。
3. 融合性沉淀弧出現支線，或同時有另一條或兩條沉淀線，說明兩孔中抗原有相同成分又有不同成分，此為部分同一性反應（圖2-3）。
雙向免疫擴散沉淀線（圖2）
（三） 免疫電泳(Immunoelectrophoresis)-示教
一、基本原理
免疫電泳法是將凝膠電泳與雙向免疫擴散兩種技術相結合的一種實驗方法。在電場作用下標本中各組分因電泳遷移率不同而分成區帶，然后沿電泳平行方向將凝膠挖一溝槽，將抗體加入溝槽內，使抗原與抗體相互擴散而形成沉淀線。根據沉淀線的數量、位置及形狀，分析標本中所含各組分的性質，本實驗常用于抗原分析及免疫性疾病的診斷。
二、實驗材料
1%離子瓊脂（pH8.6 巴比妥緩沖液加入等量蒸餾水，再加入1%瓊脂。溶解
后用脫脂棉過濾，分裝，實驗前加熱溶解置56℃-60℃水浴箱中平衡溫度備用）。
免疫電泳用玻片
待檢血清
人IgG(1mg/ml)
抗人全血清抗體
微量加樣器及塑料吸頭
尖吸管及橡皮吸頭
打孔器、解剖刀、尺、打孔模板、濕盒等。
電泳儀：將pH8.6 巴比妥緩沖液注入電泳槽內（注意正負極各槽內所加入的量應在同一水平）。并將濾紙裁至適當長度和寬度以備搭橋使用。
三、實驗方法
1．將溶化的1%離子瓊脂傾注于玻片上制成瓊脂板。
2．瓊脂板冷卻凝固后，按照模板于挖槽線上下兩側各打一個孔，并分別用微量加樣器加入待檢血清及人IgG 各15ul。
3．將瓊脂板置于電泳槽內，注意電泳標本應放負極“―”一側。并將已浸透緩沖液的濾紙一端覆蓋于瓊脂板兩側各約0.5cm,另一端浸于電泳液中。
4．接通電源，電壓、電流及電泳時間應視儀器性能而定。一般電勢梯度6V/cm，電流每板20mA，泳動時間1-2 小時。
5．電泳完畢，關閉電源，取出瓊脂板，按模板位置用解剖力挖橫槽。用特制尖吸管加入抗人全血清抗體。
6．將瓊脂板置于濕盒中，于37℃溫箱中擴散24 小時。
四、實驗結果
根據沉淀弧的位置及形狀，參照免疫球蛋白遷移范圍示意圖，識別主要Ig。