人工制造一個小室，將單細胞培養在小室中的少量培養基上，使其分裂、增殖形成細胞團的方法，稱為微室培養法，亦稱為雙層蓋玻片法。
其操作是將攜帶1個細胞的1滴培養基置于無菌載玻片上，并用無菌礦物油包圍培養基液滴。再分別在培養基液滴的兩側滴1滴礦物油，在每一礦物油滴上放一張蓋玻片。
然后，把第三張蓋玻片放在培養基液滴上，并與其他2張蓋玻片相連，在礦物油內形成包含單細胞的無菌微室，礦物油阻止微室中的水分散失，但允許氣體交換。將微室載玻片置于培養皿中培養，一旦肉眼可見到細胞團，立即揭開蓋玻片，轉移到新鮮液體培養基或半固體培養基上繼代培養。
微室培養法的特點是：①能夠在顯微鏡下追蹤觀察單細胞分裂增殖形成細胞團的全過程；②培養基少，營養和水分難以保持，pH值變動幅度大，培養細胞僅能短期分裂 。