卡式法血型鑒定、交叉配血是近幾年來逐漸興起的一項利用免疫檢測的新方法,也就是利用生物化學凝膠過濾技術和離心技術及免疫學抗原抗體特異性反應相結合的產物。此法是通過調節凝膠的濃度來控制凝膠間隙的大小,使其間隙只能允許游離的紅細胞通過,從而使游離的紅細胞和聚集的紅細胞分離。當抗原、抗體反應,抗人球試驗時,血細胞發生凝集,離心時,凝集塊不能通過凝膠間隙,而留在凝膠孔的上層,呈陽性反應。未凝集的血細胞離心時可通過凝膠間隙,而沉積在凝膠孔的底部,則呈陰性反應。此方法操作簡單、結果清楚、明確、穩定,易判定,重復性好,易保存。
一卡六孔有利于正、反定型的對比,靈敏度高。孔內加有抗血清、抗人球,可直接檢出不完全抗體和血型,標本用血量少,雖然方法簡單,但在操作時應該注意以下幾點:一是每日實驗前,先取出稀釋液、標準細胞、卡式凝膠板,放置室溫一段時間,以防冷凝集等。工作完將剩余的標準細胞、卡式凝膠板放回冰箱內保存,以防孔內凝膠干涸。
二是嚴格按操作程序操作,將所用的卡板先做上標記,并注意保質期。
三是檢查板卡的封口有無損壞,板孔內的凝膠有無干涸或氣泡,有則不能使用。
四是用正、反定型的細胞濃度5%左右,配血細胞濃度在0.8%左右,不可太濃太稀。
五是加入板孔的量一定要一致,牢記先加細胞懸液,再加血漿(血清)。
六是在加樣時,反定型孔先加樣,以使標準細胞與血漿(血清)反應。應先加細胞懸液,再加血漿(血清)。
七是纖維蛋白可吸附部分紅細胞,應將血樣離心后再做。
八是正、反定型對照,確定結果及A亞型。正定型結果者為弱陽性,就懷疑為A、B、O亞型,可重做完全測試。正、反結果不符時,請設計實驗進行分析。
九是某些藥物、疾病可導致弱陽性及正、反定型不符。細菌嚴重感染及異常血清蛋白可影響結果。
十是標本的防凝劑盡量不要用肝素防凝。由于肝素帶有高價負離子,對特殊患者可用硫酸魚精蛋白防凝。
十一是每進一批卡板,都應先做質量監測,如果質量監測呈陽性反應,可將標準細胞用鹽水洗滌再做。
十二是用完的卡板應先用1%的84消毒液浸泡后再進行焚燒處理。