厭氧培養箱安裝方法

1. 厭氧培養箱應安放在溫差較小、操作方便的位置，應避免陽光直曬和遠離采暖設備，放置平穩；
2. 將混合氣瓶、氮氣瓶安放平穩，并分別裝好減壓閥（含壓力表），安置在適當位置；
3. 接上氣路并檢查氣路，為防止漏氣，必要時可在各接管處用密封膠粘合；

使用
（一）操作室厭氧環境形成：
1. 按使用要求放置好必要的附件和器具，并向操作室內放入二個無毒塑料袋；
2. 通電源開照明燈，開溫控儀，調節所需溫度及安全溫度；
3. 操作室內放入1000g鈀粒（封閉）和500g干燥劑，并放入美蘭指示劑（封閉）；
4. 關緊取樣室內外門，并抽真空校驗；
5. 操作室內第一次置換（氮氣置換）：
  A. 先用橡皮管插入操作室內進氣口，另一頭插入塑料袋；
  B. 接通氮氣進氣路，打開氮氣控制閥1，使二只塑料袋充足氮氣，關閉閥門1，然后扎緊袋口；
  C. 把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊；
  D. 把塑料袋內氮氣漸漸放于操作室內，至全部放出。
6. 操作室第二次置換（氮氣置換）重復一次充氮過程，取樣室先抽真空，并注意隨時用腳踏開關開閉排氣。
7. 操作室第三次置換（混合氣體置換）：（混合氣體配比為N2 85%、H2 10%、CO2 5%）
  A. 調換氣路打開混合氣閥3進氣，充氣時取樣室先抽真空，并隨時用腳踏開關開閉排氣；
  B. 混合氣充滿塑料袋后，關掉混合氣閥并打開閥5，使混合氣經過流量計，調整流量計，流量為每分鐘10ml左右；
  C. 把塑料袋內混合氣漸漸排于操作室內；
  D. 通過三次換氣后，操作室內氣體含氧量已處于極微量狀態。
8. 操作室內打開粑粒除氧劑，接通除氧催化器電源進行催化除氧，一小時后開美蘭指示劑（美蘭安瓶）觀察其變色情況，不變色為操作室內達到厭氧環境；
9. 開紫外線滅菌燈，室內進行滅菌處理，滅菌時間按具體實驗自定。

（二）菌種的置入和培養：
1. 檢查取樣室內門并關緊之；
2. 打開取樣室外門，將菌種放入取樣室后即關上外門；
3. 取樣室充氮置換三次過程：打開真空泵，先抽真空度500ml汞柱（66kPa）以上停，然后人工打開氮氣閥2進氣，使指針回復零位，關掉閥2。第二次重復操作一次。第三次操作時，使真空度500ml汞柱（66kPa）以上停，然后打開閥4進混合氣，使指針回復零位，后掉閥4。取樣室充氮置換三次過程結束；
4. 如選定真空度較低就需要增加置換的次數；
5. 取樣室內外門開啟、關緊，再抽低真空度100ml汞柱（13kPa）檢驗；
6. 厭氧培養箱需要長期連續使用的條件：
  A. 每天在操作室內打開美蘭指示劑觀察，如不正常就必須重新換氣；
  B. 要長期連續輸入微量的混合氣體，使補進的氮氣能和微量的氧結合通過催化吸收，保證室內厭氧狀態，補入混合氣流量選定為每分鐘10ml左右；
  C. 連續培養運行一天，更換一次除氧劑和干燥劑。
7. 操作室內培養室內室溫度可任意選擇和控制。
8. 混合氣瓶、氮氣瓶輸出壓力調整：調節減壓閥，使輸出壓力0.1Mpa左右。

注意事項
1. 儀器盡可能地安裝于空氣清凈、溫度變化較小的地方；
2. 開機前應全面熟悉和了解各組成配套儀器、儀表的使用說明，掌握正確使用方法；
3. 培養物放入必須是在操作室內達到絕對厭氧環境后放入；
4. 如發生故障（停氣等原因）操作室內仍可保持12小時厭氧狀態（超過12小時則根據需要把培養物取出另作處理）；
5. 經常注意氣路有無漏氣現象；
6. 調換氣瓶時，注意要扎緊氣管，避免流入含氧氣體；
7. 真空泵按要求使用，定期檢查加油。