最常用的原代培養有組織塊培養和分散細胞培養。
組織塊培養是將剪碎的組織塊直接移植在培養瓶壁上，加入培養基后進行培養。
分散細胞培養則是將組織塊用機械法或化學法使細胞分散。如欲從胎兒或新生兒的組織分離到活性最好的游離細胞，經典的方法是用蛋白水解酶（如胰蛋白酶和膠原酶）消化細胞間的結合物，或用金屬離子螯合劑（如EDTA）除去細胞互相粘著所依賴的Ca2+，再經機械輕度振蕩，使之成為單細胞。
