1） 將醋酸纖維素薄膜置于MD/His -平板的His + 轉化子菌落上,用涂布棒輕壓使醋酸纖維素薄膜完全濕潤并趕盡氣泡, 使所有菌落轉移到醋酸纖維素薄膜上.
2) 在BMMY板上置一同樣大小的硝酸纖維素薄膜, 并將醋酸纖維素薄膜菌落向上置于硝酸纖維素薄膜上. 30 ℃孵育18 h 后, 將醋酸纖維素薄膜移至MDP2His 平板上, 4 ℃保存
3) 將硝酸纖維素薄膜取下, 6 %小牛血清37 ℃封閉2 h , TBS-T ( Tris-NaCl 緩沖液加0105 %吐溫20) 洗3 次( 每次10 min) . 加一抗室溫孵育2 h , TBS－T 洗膜3 次. 然后二抗室溫孵育2 h , TBS2T 洗膜3 次. 最后顯色
這時，你可以看到強弱不等的顏色，挑選染色最強的克隆，做誘導表達進一步驗證
操作時，一定要記好位置，以免不能將膜上的克隆和板上的克隆對上。