原子吸收分光光度法檢測原子吸收分光光度法

利用原子吸收分光光度法問接測定維生素C的含量，是利用維生素C可以與一些金屬離子發生氧化還原反應，通過測定反應掉的金屬離子的量，進而間接計算出維生素c的含量。
1.1以銀離子作為氧化劑的間接原子吸收分光光度法
以銀離子作為氧化劑的間接原子吸收分光光度法，是利用維生素C分子中的有二烯醇基具強還原性，可被硝酸銀氧化為去氫維生素C，同時產生黑色銀沉淀(反應式如圖2)。
 
圖2維生素C與銀離子反應的反應式
沉淀經離心分離后，將分離得到的沉淀用硝酸溶解后，再利用原子吸收分光光度計測定銀離子的含量，從而接測得維生素C含量，具體測定方法如下：
配制一系列濃度的維生素C標準溶液，依次吸取一定量的維生素C標準溶液置于10mL離心管中，分別加入2mL(1mg/mL) Ag+標準溶液，然后加水使總體積為4mL，搖勻，在室溫下避光放置35min離心分離棄去上清液，用2mL超純水洗滌沉淀3次，然后用l:1的濃硝酸3mL溶解沉淀，移入50mL的容量瓶中，加水稀釋至刻度。噴入空氣-乙炔火焰分別測定其吸光度，以維生素C標準溶液的濃度為橫坐標，以測得的吸光度值為縱坐標繪制標準曲線。最后將處理過的待測樣按上述方法測定其維生素C含量。
上述方法巾維生素C標準溶液及樣品的配制都是利用2％的檸檬酸作為溶劑，并在棕色瓶中保存，原因是維生素C在溶液中不穩定，遇氧氣、光、熱、堿性物質易受破壞，而在適當的酸性條件下比較穩定，用2％的檸檬酸溶液來配制維生素C標準溶液，減緩了維生素C被氧化的速度，同時消除了一定外界因素的十擾，使得測定結果比較穩定。
1.2 以銅離子作為氧化劑的間接原子吸收分光光度法
文獻中報道了以銅離子作為氧化劑的間接原子吸收分光光度法。該方法也是利用維生素C在酸性介質中維生素C可將Cu2+定量的還原為Cu+，然后Cu+與SCN-反應生成CuSCN沉淀，在高速離心機下有效地分離出CuSCN沉淀，洗滌后再經濃硝酸溶解，用原子吸收法測定沉淀中的含銅量，即可推知樣品中維生素C的含量。具體測定方法如下：
分別吸取1mL配制的含一定量維生素C的標準溶液(隨配隨用)(分別含維生素C 50、100、200、300、400、500 μg)和樣品提取液，依次放置于已編號的15mL離心管中，各加入1mLCuSO4飽和溶液、1mL濃度為2％硫氰酸銨溶液、0.5mL鹽酸-醋酸鈉緩沖液和0.5 mL飽和NaCl溶液充分混和，稍后離心分離，棄去上層清液，小心地用少量水洗滌沉淀2～3次(注意每次用水不能超過1 mL)，加入0.5mL硝酸溶解后，轉移至lO0mL的容量瓶中加水定容至刻度線，搖勻。分別用原子吸收分光光度計測定其含銅量，由所得的維生素C含量的標準曲線，可以得到相應樣品的試驗結果。
該方法所得的試驗結果相對標準偏差RSD在5％以內加標回收率在96.56％～100.67％，其精密度和準確度均達到痕量分析要求。此方法的線性相關系數R=O 9989，表明相關性很好。