本法系通過比較生長激素標準品(S )與供試品(T )對幼齡去垂體大鼠體重增加的程度,以測定供試品效價的一種方法。
標準品溶液的制備 試驗當日,取標準品,按標示效價用含牛血清白蛋白的0 .9% 氯化鈉溶液,制成髙、低兩種濃度的標準品溶液。一般高濃度標準品溶液配成每lm l含0. 1?0. 2 IU ,低濃度標準品溶液配成每lm l含0.025?0 .0 5 IU ,高低兩濃度比值(r )一般為1 : 0 .2 5,標準品溶液分裝成每天劑量并密封于一15°?C以下保存,臨用時融化。
供試品溶液的制備 按供試品的標示效價或估計效價(A t ) , 照標準品溶液的制備及保存方法制備和保存。
測定法 取同一來源、品系,出生26?28天,體重60?80g,同一性別,健康的大鼠,試驗前2?3 周手術摘除垂體,手術后于屏障環境飼養使其恢復。取去垂體手術后2?3 周、體重變化小于手術前士 10%的大鼠,按體重隨機等分成4組,每組至少8只,每只編號并記錄體重。分別自頸部皮下注射一種濃度的標準品溶液或供試品溶液0.5ml,每日1 次,連續6日。于最后1 次給藥后2 4小時,處死大鼠,稱體重,必要時實驗結束后可進行尸檢,切開蝶鞍區,肉眼檢査有無垂體殘留,剔除有垂體殘存的大鼠。每只動物給藥后體重增加的克數作為反應值。供試品與標準品各劑量組所致反應的平均值應相當。照生物檢定統計法(通則1431) 中的量反應平行線測定法計算效價及實驗誤差。
本法的可信限率(F L% )不得大于50%。