1. 用墊片組裝凝膠平板。夾層每邊的墊片之上用夾子固定，并置于凝膠支架上。注意玻璃平板和墊片的平齊，收緊夾子以保證密封圈不發生泄漏。調整平板的水平和垂直，在平板間將放上凝膠識別標簽，使之留在右下角。
2. 在一個真空瓶中分別加入30%丙烯酰胺/0.8%亞甲雙丙烯酰胺，凝膠緩沖液和水，配制凝膠溶液。真空下脫氣5 min。
3. 加入10%SDS和TEMED，搖勻；再加入10%過硫酸銨，搖勻。
4. 加入溶液于凝膠夾層中，加至離短的玻璃平板頂部5 mm 處，上面加一層水飽和異丁 醇或水，使凝膠聚合1.5 h。 5. 入平衡緩沖液完全覆蓋第1向凝膠。 6. 將凝膠連同平衡緩沖液一起倒于一個置于一燒杯之上的尼龍網篩上，然后將凝膠移于一 5 cm x 15 cm 的玻璃平板上，用小鏟將凝膠沿凝膠夾層的一邊放好。
7. 用吸管往將要加樣的平板凝膠的頂部加一很薄的熱的0.5%瓊脂糖。
8. 用小鏟小心地將第1向凝膠滑到玻璃平板并橫跨于平扳凝膠的頂部，第1向凝膠藍染的一端靠右。 9. 往第1向凝膠上加一層熱的0.5%瓊脂糖，讓瓊脂糖固化并將凝膠固定。
10. 將凝膠夾層安置于電泳槽中。往上、下槽加入預冷的電泳緩沖液。
11. 用管子將冷卻劑的入口和出口連好，開始讓冷卻劑流動，使電泳槽中緩沖液的溫度保持在10~20℃，保證電泳過程中凝膠得到充分的冷卻。
12. 用導線將電泳室與電猓連接，每片凝膠在15~20 mA的電流下電泳至指示染料到達凝膠的底部。
13. 在電泳結束時將電壓調至零位，關閉電源。從電泳單元中取出凝膠夾層，并取走夾子。 用小鏟將玻璃平板橇起。 14. 凝膠染色或進行免疫印跡或放射自顯影。 展開 | 