照高效液相色譜法(通則0512)測定。
供試品溶液取本品10粒,精密稱定,置小燒杯中,置70~80℃水浴上溫熱熔融,在不斷攪拌下冷卻至室溫,精密稱取適量(約相當于甲硝唑20mg),置100m1量瓶中,加甲醇水(70:30)約70ml,置70~80℃水浴中劇烈振搖約10分鐘,再置70~80℃水浴中超聲振搖使供試品溶解,放冷,用甲醇-水(70:30)稀釋至刻度,搖勻,置冰浴中冷卻2小時,取出迅速濾過,續濾液放至室溫對照品溶液取甲硝唑對照品、克霉唑對照品與醋酸氯己定對照品各適量,精密稱定,加甲醇水(70:30)溶解并定量稀釋制成每1ml中約含甲硝唑2004g、克霉唑160μg與醋酸氯己定8g的溶液。
色譜條件用辛基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以甲醇水三乙胺(70:30:0.3)(含庚烷磺酸鈉10mmol/L,用磷酸調節pH值至4.0)為流動相;檢測波長為260nm;進樣體積20μl系統適用性要求理論板數按克霉唑峰計算不低于2500,甲硝唑峰、克霉唑峰與氯已定峰之間的分離度均應符合要求。測定法精密量取供試品溶液與對照品溶液,分別注入液相色譜儀,記錄色譜圖。按外標法以峰面積計算。