2.2 Mch激發豚鼠后sRaw回復至基礎水平所要時間
應用PC100濃度的Mch霧化豚鼠，豚鼠的sRaw較基礎阻力上升1倍后，部分豚鼠的sRaw仍可繼續上升，4 min后阻力逐步回落，一般30 min內可以回落至基礎值水平，6號豚鼠6 min氣道阻力即回落至基礎水平，但4號豚鼠1 h后氣道阻力才回落至基礎水平。
2.3 雙室體描儀測量豚鼠sRaw和氣道反應性測量結果的重復性
正常對照組B豚鼠在第1、15天分別測量兩次基礎氣道阻力sRaw為(3.25±0.67) cmH2O·s、(3.33±0.58) cmH2O·s、(3.30±0.56) cmH2O·s、(3.32±0.75) cmH2O·s，4個時間點測量的氣道阻力兩兩比較，差異沒有統計學意義(P>0.05)。相對應測量豚鼠的4次的氣道反應性(log2PC100)值分別為8.48±0.94、 8.64±1.04、 8.56±0.67、 8.64±0.60，其值兩兩比較，差異沒有統計學意義(P>0.05)。此說明應用雙室體描儀測量豚鼠sRaw和氣道反應性的重復性良好，可對豚鼠進行這兩項指標的動態多次檢測。
2.4 驗證豚鼠的哮喘模型
哮喘模型組豚鼠OVA激發前后sRaw分別為(2.87±0.53) cmH2O·s和(7.08±1.82) cmH2O·s(P<0.01)，說明豚鼠OVA激發后氣道阻力高于OVA激發前氣道阻力。OVA激發前后log2PC100值分別為8.48±1.17和6.64±1.26(P<0.01)，說明豚鼠OVA激發后氣道反應性高于OVA激發前。從呼吸生理的角度看，應用雙室體描儀測定sRaw和氣道反應性，能有效地驗證豚鼠的哮喘模型。
3 討論
體積描記法是一種無創的測定氣道阻力和氣道反應性的方法，操作簡單，可進行多次測量，便于進行自身對照研究，目前在國外得到較為廣泛的應用。整體體積描記法由Jacky[2]首先報道。其允許動物自由活動、進食、飲水，操作容易，可測定時間長。但應用整體體積描記法測定sRaw的準確性卻受到一些學者的質疑[3][4][5]。雙室體積描記法由Johanson[6]首先報道，1979年Pennock[7]應用于豚鼠氣道阻力的測定。由于國內條件有限，應用體積描記法測量動物的肺功能少有報道[8]。
豚鼠容易致敏，能產生Ⅰ型和Ⅳ型變態反應，特別適合于制作過敏性哮喘動物模型。但國內文獻所構建的豚鼠哮喘模型往往缺少呼吸生理的功能指標，嚴格來說，只能算是豚鼠變應性氣道炎癥模型。所以有必要對這種“變應性氣道炎癥”進行肺功能的測定以證實哮喘模型的構建成功。同時這種呼吸生理功能的測定，利于觀察藥物等干預手段的效果，利于對哮喘發病及診療機制的探討。本實驗室在國內首次購進美國BUXCO公司的雙室體描儀對豚鼠的sRaw和氣道反應性進行了測定。雙室體積描記系統包括體積描記箱(Plethysmograph)、超聲霧化器(Ultrasonic Nebulizer)及霧化調節系統、前置信號放大器(MAXII preamplifier unit)、信號處理系統(BioSystem XA for Windows software)等幾部分。體積描記箱由頭室(用于測量鼻部氣流的變化)和體室(用于測量胸腔氣流的變化)構成，每一室均連接一個流量傳感器以測定室內的呼吸流量變化。其工作原理是根據鼻腔比胸腔的氣流滯后時間dT來計算氣道阻力sRaw。由于先有胸廓的運動才會產生氣體進出體內的過程，鼻部的氣流滯后于胸部的氣流產生時差dT，當sRaw增加時，鼻部氣流與胸部氣流的相位差會增加。根據公式：sRaw=[(TI+TE)/(2π)×(Patm-47)×1.36×2π×dT/(TI+TE)](公式中Patm代表大氣壓，TI代表吸氣時間，TE代表呼氣時間)，通過軟件(BioSystem XA software with NAM analyzer)分析，可以計算出sRaw，從而了解動物的氣道阻力情況。實驗所得數據顯示，PC100濃度的Mch霧化豚鼠后，豚鼠的sRaw在幾分鐘內仍可上升，在1 h內阻力回到基線水平。要排除測定中應用Mch激發會對下一次sRaw的測定造成影響，兩次測定sRaw的時間間隔應該在1 h以上，所以為了驗證雙室體描儀測量豚鼠sRaw和氣道反應性測量的重復性，實驗第1、15天重復測定正常對照組豚鼠各1次，同一天的測量時間間隔選取為2 h。結果顯示各次的氣道基礎阻力和氣道反應性無明顯差異，證明應用雙室體積描記法測定豚鼠的氣道基礎阻力和氣道反應性的重復性良好。本實驗結果表明，OVA致敏豚鼠激發后sRaw和氣道反應性較激發前均顯著提高，證明OVA致敏及激發豚鼠是簡單有效的構建哮喘模型的方法，雙室體積描記法的應用為哮喘研究提供了有效的手段。
參考文獻：
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[2]Jacky JP. A plethysmograph for long-term measurements of ventilation in unrestrained animals[J]. J Appl Physiol, 1978, 45(4): 644-7.
[3]Petak F, Habre W, Donati YR , et al. Hyperoxia-induced changes in mouse lung mechanics: forced oscillations vs. barometric plethysmography[J]. J Appl Physiol, 2001, 90(6): 2221-30.
[4]Lundblad LK, Irvin CG, Adler A, et al. A reevaluation of the validity of unrestrained plethysmography in mice[J]. J Appl Physiol, 2002, 93(4): 1198-207.
[5]Mitzner W, Tankersley C. Interpreting Penh in mice[J]. J Appl Physiol, 2003, 94(2): 828-31.
[6]Johanson WG Jr, Pierce AK. A noninvasive technique for measure- ment of airway conductance in small animals[J]. J Appl Physiol, 1971, 30(1): 146-50.
[7]Pennock BE, Cox CP, Rogers RM, et al. A noninvasive technique for measurement of changes in specific airway resistance[J]. J Appl Physiol, 1979, 46(2): 399-466.
[8]宋建勇, 任渝祥, 林輝, 等. 用PKC 抑制劑Rottlerin治療小鼠實驗性哮喘的研究[J]. 第三軍醫大學學報, 2003, 25(16): 1411-4.