雙氫青蒿素照高效液相色譜法(通則12)測定。
臨用新制供試品溶液取本品10片,精密稱定,研細,取適量(約相當于雙氫青蒿素25mg),精密稱定,置25ml量瓶中,加乙腈-水(6:4)超聲使溶解,放冷,用乙腈水(6:4)稀釋至刻度,搖勻,離心,取上清液。對照品溶液取雙氫青蒿素對照品約25mg,精密稱定,加乙腈-水(6:4)溶解并定量稀釋制成每1ml中約含1mg的溶液。系統適用性溶液取雙氫青蒿素對照品與青蒿素對照品各適量,加乙腈-水(8:2)超聲使溶解并稀釋制成每1ml中含雙氫青蒿素與青蒿素各1mg的混合溶液。
色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(YMCPack ODS-AQ,4.6mm×250mm,5m或效能相當的色譜柱);以乙腈-水(60:40)為流動相;檢測波長為216nm,進樣體積20pl系統適用性要求系統適用性溶液色譜圖中,出峰順序依次為α雙氫青蒿素、β雙氫青蒿素與青蒿素,與青蒿素峰(保留時間約為10分鐘)相比,a雙氫青蒿素的相對保留時間約為0.6,青蒿素與相鄰雙氫青蒿素峰之間的分離度應大于2.0測定法精密量取供試品溶液與對照品溶液,分別注入液相色譜儀,記錄色譜圖。按外標法以雙氫青蒿素兩個峰面積的和計算。
磷酸哌喹照高效液相色譜法(通則0512)測定。供試品溶液取含量測定雙氫青蒿素項下的細粉適量(約相當于磷酸哌喹250mg),精密稱定,置100ml量瓶中,加流動相適量,超聲使溶解,放冷,用流動相稀釋至刻度,搖勻,濾過,精密量取續濾液1ml,置100m1量瓶中,用流動相稀釋至刻度,搖勻。對照品溶液取磷酸哌喹對照品適量,精密稱定,加流動相溶解并定量稀釋制成每1ml中約含磷酸哌喹25μg的溶液色譜條件與系統適用性要求見有關物質Ⅱ項下。測定法精密量取供試品溶液與對照品溶液,分別注入液相色譜儀,記錄色譜圖。按外標法以峰面積計算。