在堿性溶液（NaOH）中，雙縮脲（H?NOC-NH-CONH?）與銅離子（Cu2?）作用，形成紫紅色絡合物（該物質的分子結構式見圖），該反應即雙縮脲反應。
銅溶液作用，就會形成紫色或藍紫色絡合物。
注：除-CO-NH-有此反應外，酰胺基（-CO-NH?）、亞甲基（-CH?-）、亞氨基（-NH-）、（-CS-CS-NH?）等基團亦有此反應。值得注意的是，發生雙縮脲反應，一般需要含有兩個或兩個以上的肽鍵（-CO-NH-），或與它類似的結構，二肽不能發生雙縮脲反應 。例如，甘氨酰甘氨酰甘氨酸（Gly-Gly-Gly，一種三肽，含有兩個肽鍵）和雙縮脲（biuret）結構相似，可以發生（positive response）雙縮脲反應；而甘氨酰甘氨酸（Gly-Gly，一種二肽，含有一個肽鍵），不能發生（negative response）雙縮脲反應（圖1）。
圖1 甘氨酰甘氨酰甘氨酸，甘氨酰甘氨酸和雙縮脲