實驗方法原理 凡分子中含有兩個甲酰胺基(-CONH2-)的化合物都能與堿性銅溶液作用,形成紫紅色化合物這一反應稱雙縮脲反應蛋白質分子中有許多肽健(-CONH2-)都能起此反應,而且各種血漿蛋白顯色程度基本相同.
實驗步驟
一、實驗操作:按表進行
混勻,置25℃30min。(37℃10min)在波長540nm。 比色杯直徑1.0cm以空白管調零、讀取各管光密度。
二、計算
血清總蛋白g/L=測定管(或校正)吸光度/標準管吸光度×蛋白標準液濃度(g/L)
注意事項
1、血清蛋白質含量一般用g/L表示,因各種蛋白質的分子量不同,不能用mol/L表示。
2、酚酞、溴磺酞鈉在堿性溶液中顯色影響雙縮脲測定結果,右旋糖酐可測定管渾濁亦影響結果,理論上這些干擾均可用相應的標準空白管來除,如標準空白管吸光度太高,可影響到定的準確度.
3、含脂類極多的血清,顯色應渾濁不清,可用乙酸3.l抽提后再進行比色。
參考值:60-80g/L