先將雙縮脲試劑A加入組織樣液，振蕩均勻（必須營造堿性環境），再加入雙縮脲試劑B，搖蕩均勻。如果組織里含有蛋白質，那么會看到溶液變成紫色。具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物皆可與雙縮脲試劑產生紫色反應。蛋白質的肽鍵在堿性溶液中能與Cu2+絡合成紫紅色的化合物。顏色深淺與蛋白質濃度成正比。 雙縮脲（NH2CONHCONH2）是兩個分子脲經180℃左右加熱，放出一個分子氨后得到的產物。 雙縮脲試劑本是用來檢測雙縮脲，因蛋白質中也有-CONH-基也可用于檢驗蛋白質，與蛋白質接觸后的顏色呈紫色。（不要等量，B液遠少于A液，否則硫酸銅藍色會遮蓋反應出的紫色，影響判斷。）