1、使用前每個組份輕輕混勻，然后2000rpm離心20s
2、取滅過菌且無核酸酶的0.2ml離心管，依次加入2～5μgRNAnμL
3、65℃保溫5min，然后冰浴5min；
4、往3步驟中的0.2ml離心管依次加入下列組份
RNase抑制劑（40u/μL）0.5μL
10×M-MLVReactionBuffer2μL
DTT（200mM）1μL
逆轉錄酶（M-MLV）1μL
5、輕輕混勻后，然后2000rpm離心20s；
6、先在37℃保溫1hr，然后70℃保溫15min；
7、上述產物可立即進行下一步的PCR反應或-20℃保存。