口蹄疫病毒檢驗

口蹄疫病毒檢驗
Foot-and-mouth disease virus，FMDV
口蹄疫病毒(Food and mouth disease virus，FMDV)是牛、豬、羊等偶蹄動物口蹄疫的病原。
FMD：OIE A類傳染病之一，是全球性最重要的動物健康問題之一。1898年，德國科學家Loeffler與Frosch：口蹄疫病畜的病料通過濾菌器后→仍能使健康動物發病。

一、生物學特性
口蹄疫病毒屬于：微RNA病毒科(Picornaviridae)口蹄疫病毒屬(Aphthovirus)，屬內只有口蹄疫病毒一種。二十面體對稱，直徑20～25nm，無囊膜，病毒基因組為單股正鏈RNA，在RNA芯髓外對稱衣殼上有32個殼粒。電鏡下，可見病毒粒子表面的顆粒狀結構和一個密度較低的中心。此外尚可見有較小的蛋白質亞單位顆粒，直徑7～8nm，無感染性。病毒子在宿主細胞漿內可形成晶格狀排列。本病毒是動物病毒中發現最早的一種。

二、抵抗力
對酸敏感，病毒在pH為6.5的緩沖液中、4℃條件下14h滅活90％，在pH5.5時1min滅活90％，在pH5.0時每秒鐘滅活90％，pH3.0時瞬間滅活，病毒在pH7.0～7.5時十分穩定。病毒的感染性RNA在pH4.0時較原病毒穩定。口蹄疫病毒對堿也很敏感。對消毒劑的抵抗力較強。病毒在低溫下能長期保存。病毒的滅活溫度為85℃1min，70℃10min，60℃15min，但裸露的RNA對熱較穩定。

三、抗原性
根據病毒的血清學特征，目前已知口蹄疫病毒有七個主型：A、O、 C、南非Ⅰ、南非Ⅱ、南非Ⅲ和亞洲Ⅰ型(SAT1、SAT2、SAT3、Asia1 )。各型之間沒有相互免疫作用。
本病毒有較大的變異性，病毒在保存和流行中，常發生血清學的變異，有時流行初期與末期毒型不一致，幾乎每年都有新的亞型出現，本病毒已發現85個以上的亞型。

四、培養特性
1．組織培養 利用犢牛、幼豬的腎臟或豚鼠、牛胚胎上皮組織制成細胞單層來培養病毒，病毒繁殖后，使細胞發生病變。
2．雞胚培養 本病毒不易在雞胚上生長，必須反復交替通過牛與雞胚或在添有牛舌上皮的雞胚組織培養繼代后，才可能適應于雞胚或雞胚組織培養。

在感染了口蹄疫病毒的細胞培養液中，有大小不同的4種粒子：最大的粒子為完整病毒；第二種為不含RNA的空衣殼；第三種為衣殼蛋白亞單位；第四種是病毒感染相關抗原。

五、致病性
在自然條件下，主要發生于偶蹄獸，其中以奶牛和黃牛最易感，其次是水牛，牦牛、豬，再次為羊和駱駝等。野生偶蹄獸也能發生。從流行病學的觀點來看，綿羊是本病的“儲存器”，豬是“擴大器”，牛是“指示器”。
1.傳播途徑:呼吸道、消化道(被污染的飼料、飲水) ；創傷、皮膚、粘膜
2.流行特點：有一定的季節性(以冬、春季節發病較多，夏季可以平息),傳播迅速,一般沿交通線進行傳播

六、微生物學診斷
(一)豚鼠接種試驗 選擇500g以上的健康豚鼠4～6只，剪去后肢足掌部被毛，用濕棉花球洗凈，再用70％酒精棉消毒。將足掌部皮膚或口腔粘膜劃破，把感染性病料涂擦于劃破處。第二天如局部有水皰，即可確診。
(二)乳鼠接種試驗 選2～7日齡乳鼠5只，4只做檢樣，1只做對照，每只頸背部皮下接種0.1ml，觀察1周，如有死鼠,及時取出，制備1:3檢樣，傳代。如無死鼠取活鼠凍死傳代，傳2-3代不死亡為陰性。
FMDV接種乳鼠：呼吸急促，四肢和全身麻痹。