嗎啡的鎮痛作用
一、 目的：
1、學習鎮痛藥的篩選方法
2、觀察嗎啡的鎮痛作用
二、 原理：
疼痛概念：由于傷害性刺激所引起的情緒反應、行為反應以及生理功能障礙。
疼痛是許多疾病的癥狀，是機體受到不良刺激或損害的一種信號和反應。根據疼痛所表現出的行為反應，目前應用的疼痛模型有：
1、熱刺激法
1) 輻射熱刺激法
用一定強度的溫度來刺激動物軀體的某一部分使其產生疼痛反應。大白鼠以甩尾反應時間為痛反應指標。實驗時，用秒表計時，從照射開始到甩尾的時間作為痛閾。
2) 熱板法
實驗時，把小白鼠放在預先加熱到55℃金屬板上，以舔后足為常用痛反應指標。給藥后痛反應時間延長一倍以上者作為有效鎮痛藥物。
注意事項：
1) 反復連續測定應注意防止局部燙傷而影響結果。
2) 注意正常鼠體溫應與室溫相近，室溫應在20℃左右。
3) 給藥前測試痛閾時，注意反應時間少于2s（10s,熱板法）或大于10s（30s，熱板法）表示該動物反應過敏或遲鈍，則剔除不用。
4) 熱板法要求必須用雌性動物。
評價：
1) 儀器裝置簡單，反應靈敏，指標明確。
2) 對組織損傷小，可反復利用動物。
3) 痛反應潛伏期長，利于比較藥物鎮痛作用的強弱、快慢、持續時間。
4) 可用于篩選麻醉性和非麻醉性鎮痛藥
5) 但由于輻射熱刺激法甩尾反應純粹是一種脊髓反射，因此骨骼肌松弛藥也會出現陽性結果，應加以注意。
2、機械刺激法
1) 大白鼠尾尖壓痛法 用鈍刀口用力壓大白鼠尾，以產生嘶叫作為痛閾值。此法與大白鼠的年齡關系很大，以100-150g體重為宜。壓痛部位以大白鼠尾尖1/3處敏感性較高。
3、電刺激法
1) 齒髓刺激法 目前公認牙髓神經是對痛頗敏感的刺激部位，其痛反應近似臨床病理性疼痛。因此齒髓刺激法是評價鎮痛藥的標準而可靠的方法。此法適用于狗、貓、家兔、大白鼠等，其中以家兔應用最多。動物在麻醉下用電鉆在牙齒上鉆孔后，將電極插入齒髓作慢性埋藏電極。電刺激時，動物因疼痛會出現咀嚼運動與擺頭等反應，這些反應可視為痛閾的指標。
方法評價：反應靈敏、穩定，電刺激引起的舔舌/咀嚼反應比較一致。
2) 鼠尾刺激法 以串脈沖方波刺激大白鼠尾尖1/3處，以引起甩尾和嘶叫反應的電流強度作為痛反應指標。
4、化學刺激法 許多化學物質如強酸、強堿、鉀離子、緩激肽等，接觸到完整的皮膚和粘膜時，即引起疼痛反應。因此，將某些化學物質給入動物體內可產生疼痛，造成疼痛模型，作為研究疼痛生理及篩選鎮痛藥物的方法。小白鼠扭體法是篩選鎮痛藥的常用方法之一，采用一些化學刺激物注入小鼠腹腔內，引起深部的、大面積而較持久的疼痛刺激，致使小白鼠產生“扭體”反應（腹部內凹、軀干與后腿伸張、臀部高起）。觀察給予化學刺激藥物15分鐘內發生“扭體”反應的小白鼠或各小白鼠發生的“扭體”次數。如：酒石酸蒂鉀、醋酸等。化學刺激法是篩選非麻醉性鎮痛藥的常用方法。
三、 材料：
1、動物：小鼠 雌性（雄性動物受熱陰囊下垂，由于陰囊皮膚對熱敏感，小鼠易跳躍，觀察不到舔后足的現象。）
2、器材：恒溫水浴、熱板、天平、鼠籠、注射器
3、藥品：0.1%鹽酸嗎啡、生理鹽水
四、 方法：
1、調節儀器：55±0.5℃
注意：水量應以剛能浸入熱板底為宜，不宜過多，致使熱板漂浮。應保證熱板底的溫度是55±0.5℃，
2、預選：10只選6只合格鼠。
原則：
1) 痛閾值為從小鼠放入熱板到出現舔后足現象的時間，用秒表計時。
2) 放入熱板后，若小鼠跳躍者剔除。
3) 痛閾時間應在10-30S之間，否則剔除。
4) 應測兩次痛閾時間，取均值，但需注意兩次測定的時間間隔應超過5分鐘。
3、稱重、標記、分組（按痛反應時間分組）。
4、給藥：
對照組：i.p. 生理鹽水 0.15ml/10g
給藥組：i.p. 嗎啡 0.15ml/10g
測定給藥后15’、30’、45’、60’的痛閾值。
注意：
1) 每隔2’給藥1只小鼠
2) 每只小鼠在一個時間點上測1次。
3) 每個熱板只能放1只小鼠。
4) 小鼠60S還沒有出現舔后足現象，應立即取出，防止小鼠腳掌燙傷。痛閾值按60S計。
5) 熱板內不許有水、鼠糞等異物。
五、 結果處理：
a) 計算不同時間痛閾提高百分率：
痛閾提高百分率＝
統計每四組同學的數據，求出均值，標準誤，進行下一步計算。
b) 作圖：以時間為橫坐標，以痛閾提高百分率均值為縱坐標作圖，以標準誤描述誤差線，各時間點以折線連接。
c) T檢驗：
同抗炎實驗。