實驗材料 中性粒細胞
試劑、試劑盒 NBT鹽水PBS硝基藍四氮唑肝素甲醇沙黃水
儀器、耗材 試管毛細滴管玻片培養箱顯微鏡
實驗步驟
一、試管法
肝素抗凝血0.1 ml 滴于小試管底部,再加入等量NBT應用液
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37℃,30分鐘(中間搖動一次),再置室溫15分鐘
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搖勻,用毛細管取一滴放于玻片一端,做血涂片
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立即用電吹風吹干,甲醇溶液固定1分鐘,10 g/L 沙黃水溶液染色5分鐘
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PBS沖洗、自然干燥、油鏡檢測
二、微量法
取硅油處理的1 mm×75 mm 的毛細管取末梢血至30 mm 處
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立即吹入硅油處理的凹玻片中,與1/30量的0.05%肝素溶液混合
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加等量的1 g/L NBT,輕輕搖動混合,濕盒內,37℃,室溫15分鐘
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用毛細管吸去表層上清液,用硅油處理的毛細管吹數次混勻
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吸出少許制成血片,空氣干燥,沙黃水溶液染色,油鏡觀察
三、結果
1. 血片中有10%以上的中性粒細胞的胞質中有藍紫或藍黑顆粒沉著,其沉著顆粒形狀大小不一,有的呈大塊狀,有的呈點狀或放射狀。
注意事項
NBT配制一定要完全溶解,濾液要呈透明的淡黃色,儲存于棕色瓶中,NBT應用液應于用前配制。血涂片要求推出尾部,不可過厚或過薄。血液與NBT要充分混合,保溫時間不能過長。