(1) 該法最常出現的問題是試劑失效或反應系統被污染。試劑中最不穩定的是NADH和谷氨酸脫氫酶。在分析過程中應注意以下幾個方面：如用血漿則不能用含氟化合物或NH4+的抗凝劑，前者可抑制尿素酶活性，后者則可參與反應。
(2) 試劑空白吸光度應大于1.2A，否則說明NADH被氧化。同種試劑、儀器，在分析條件不變的情況下，測定得F值應相對恒定，否則說明試劑失效。
(3) 復溶試劑勿振動，以免酶變性失活。必須用無氨水復溶試劑。試劑杯、樣品杯、反應杯要無氨、潔凈、無酸堿污染，應每次定標，并跟測質控血清。
