四乙基羅丹明標記抗體﹠四甲基異硫氰酸羅丹明標記抗體
四乙基羅丹明標記抗體：
稱取1g RB200及2g PCL5放在乳缽中于通風櫥中研磨5min；
2.加入10ml無水丙酮，不斷攪拌，5min后過濾，用濾液進行標記抗體。剩余部分吸附在濾紙上，于4℃干燥保存；
3.量取一定量的濃度為20mg/ml的抗體，按1：1：1的比例分別加入等體積的生理鹽水和0.5mol/L pH9.0的碳酸鹽緩沖液來稀釋抗體；
4.再加入0.1ml的RB200溶液，邊滴加邊攪拌，在0—4℃中結合12—18h；
5.用生理鹽水透析5—7h，經葡萄糖凝膠G-50柱層析，除去游離熒光素，分裝，保存于4℃備用；
四甲基異硫氰酸羅丹明標記抗體：
量取10ml濃度為6mg/ml的IgG，加在濃度為0.1mol/L pH9.5的碳酸鹽緩沖液中透析過夜；
2.將四甲基異硫氰酸羅丹明按每毫克IgG加入5—20μg的比例溶于濃度為1mg/ml二甲基亞砜中，取此溶液300μl，逐滴加入抗體溶液中，同時用電磁攪拌；
3.在室溫中避光攪拌2h；
4.把結合物移入直徑3cm，高30cm的Bio-Gel P-6層析柱，此層析柱已用0.01mol/L pH8.0的平衡過，流速為1.5ml/min；
5.收集到的先流出的紅色結合物即為標記抗體，分裝后于4℃保存備用