1、樣品必須保持一定的純度不含光吸收的雜質，溶劑必須在測定波長沒有吸收干擾;樣品能完全溶解在溶劑中, 形成均一透明的溶液。
2、氮氣流量的控制
3、緩沖液、溶劑要求與池子選擇：緩沖液和溶劑在配制溶液前要做單獨的檢查，看是否在測定波長范圍內有吸收干擾， 看是否形成沉淀和膠狀；在蛋白質測量中，經常選擇透明性極好的磷酸鹽作為緩沖體系。
4 樣品濃度與池子選擇
樣品不同，測定的圓二色光譜范圍不同，對池子大小(光徑)的選擇和濃度的要求也不一樣。蛋白質CD光譜測量一般在相對較稀的溶液中進行。
