圓二色譜的原理及其應用如下:
圓二色譜的原理
平面偏振光通過具有旋光活性的介質時,由于介質中同一種旋光活性分子存在手性不同的兩種構型,它們對平面偏振光所分解成的右旋和左旋圓偏振光吸收不同,出射時電場矢量的振幅不同,再次合成的偏振光不是圓偏振光,而是橢圓偏振光,從而產生圓二色性。
圓二色性常用橢圓度0表示,是平面偏振光離開樣品池的角度。
圓二色譜的應用圓二色譜在測定小分子化合物與DNA相互作用方面的研究主要是DNA與配基(包括小分子和蛋白質等大分子)相互作用。圓二色譜可以測定DNA和蛋白質的空間結構,DNA的圓二色譜是由其骨架結構中的不對稱糖分子和由這些糖分子的構型決定的螺旋結構所產生的,根據配基對原有的DNA圓二色譜信號的影響。
以及誘導產生的圓二色譜新信號(ICD)的不同特點不僅可以得知配基與DNA具有相互作用,還能推配基與DNA結合的不同模式。小分子與DNA相互作用的典型方式有3種嵌入溝結合和烷基化金屬化。很多與DNA結合的配基本身無手性。無光學活性,而與DNA相互作用后,使該配基的構象發生了改變,成為具有手性的空間排列。
也可以通過和DNA堿其的電子躍許偶極短間的偶合而產生CD信號,稱為誘導的員二色譜,在小分子與DNA混合樣品的C1)譜中,如觀察到(0的吸收帶即表示該配與DNA存在著相互作用。根據DNA與配基相互作用產生的ICD的不同特征,可以對配基與DNA的作用方式,以及DNA分子的幾何形狀進行定性的,經驗性的推測。
DNA嵌入劑一般表現為強度最大不超過10的ICD信號,如果ICD的信號較強則表示配體與DNA小溝發生了結合(圖3)。如果配基的電子躍汗保極銷方向平行干堿其對的長軸方向CD信號為表示該分子的長軸與鎮鏈DNA的堿其對間外手平行的目何位害(圖A)如果垂直干堿其對的長方向ICD為負表示該分子的長軸與短鏈DNA的堿基對間處于垂直。
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