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  • 發布時間:2014-08-21 14:10 原文鏈接: 在海上進行實時DNA測序

      太平洋中部已經破曉,MY Hanse Explorer科考船上正在煮咖啡。啜飲之間,大約有十幾位科學家在對這一天的工作進行籌劃。一些科學家將穿上潛水服,潛入海平面以下采集南萊恩群島(Line Islands)眾多珊瑚礁周圍的水樣。其他科學家們將要鼓搗呼呼作聲的設備和散落在158英尺高考察船上的精密儀器。他們都有一個共同的目標:成為將 DNA測序儀帶到現場、進行遠程實時測序的第一個研究小組。盡管在海洋上困難重重,他們仍然成功了。

      這次為期三周、五個島嶼的科考活動發生在去年,研究人員包括圣地亞哥州立大學計算機科學家Rob Edwards、生物學家Forest Rohwer、博士后學者Andreas Haas和研究生Yan Wei Lim。他們與圣地亞哥地區和世界各地的其他研究人員一起,將這次科考活動和方法發表在2014年8月19日的《PeerJ》期刊。

      萊恩群島調查

      在過去的十年當中,圣地亞哥州立大學的生物學家和計算機科學家,一直都是前往Lind島收集和分析珊瑚棲息地,以更好地了解生活在那里的生物,以及它們如何爭奪資源,它們的存在對珊瑚生態系統有什么影響。一直困擾Edwards的是,他們只能等到回到世界另一端的實驗室,才能分析所得到的數據和產生新的假說。

      Edwards說:“如果我們在現場就能夠輸出實驗數據,我們就可以當時當地解決這些問題。”這種模糊概念成長為一個雄心勃勃的計劃——將笨重而昂貴的實驗設備帶到海洋上,旨在分析樣品的DNA組成,并給出其基因組的詳細信息。

      最初該計劃受到公眾的質疑。Edwards說:“如果你并不能確定會安全歸來,那么,對于將一臺約50萬美元的設備帶到太平洋中部,人們還是有點猶豫不決。”

      盡管如此,他和同事們對于如何在船上運行DNA測序儀,擬定了一份草案。最后,研究小組攜帶著Life Technologies生物技術公司提供的一臺測序儀——Ion Torrent PGM,前往萊恩群島。

      存在的問題及對策

      問題和障礙是多方面的。首先,在運輸途中,機器所需要的觸摸屏幕被打破。Edwards不得不侵入測序儀的軟件,使用他的筆記本電腦對其進行操作。

      其次,他們必須找到放置該設備各種零件的房間。他們將測序儀放在洗衣房,因為這是船舶的最低點,當船搖晃時對這里的影響最小。微生物實驗設備放在上層后甲板。DNA提取平臺置于一個船艙里。餐廳甲板被用來放置PCR儀,用以DNA樣本擴增。

      一旦一切都已到位,博士生Lim的任務是校準測序儀。通常,在實驗室中這需要大約15分鐘。然而,由于船的搖擺,這大約花了5個小時。

      當時還有鯊魚。Lim回憶說,每次潛入水底收集樣本時,她都會看到周圍有20到30只好奇的鯊魚亂轉。她說:“我并不害怕。如果你靠太近,它們只是游走。”

      盡管遇到了挫折,研究人員還是設法完成了所有工作。他們成功地收集到樣本,測定了樣本的DNA,并在旅途中發現了新的科學問題。總共有26種細菌基因組和 2個宏基因組,進行了測序,這考慮到了存在于一個給定區域中的所有DNA。

      Edwards說,下一次他們希望收集更多的數據,并在現場開發和測試更復雜的假說。

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