培養基及無菌水的制備

一、基本原理

    培養基的種類很多,不同微生物所需要的培養基不同.培養基制成后的物理狀態可分為液體、固體、半固體三種類型.目前所用培養基均為已配制好的生物試劑和紙片.

二、器材

    三角瓶、試管、燒杯、玻棒、天平、搪瓷杯、量筒、鋁箔紙、角匙、杜氏小管、硅膠塞、電爐

三、培養基的種類

    營養瓊脂培養基、乳糖膽鹽發酵培養基、乳糖發酵培養基、伊紅美蘭瓊脂培養基、馬鈴薯-葡萄糖瓊脂培養基（附加抗菌素）、平板計數瓊脂、月桂基硫酸鹽胰蛋白凍肉湯、煌綠乳糖膽鹽肉湯、EC肉湯、高鹽察氏瓊脂、三糖鐵瓊脂等

四、方法步驟

1、培養基的制備：

（1）稱量：根據培養基的配方,稱取適量藥品于搪瓷杯中;

（2）溶解：用量筒量取所需水量,置電爐上加熱,一邊攪拌,至完全溶解,加熱至沸騰,拔掉電源,待冷卻;

（3）分裝：根據不同需要,立即趁熱分裝入三角瓶或試管中,分裝三角瓶以不超過三角瓶一半為宜,分裝試管一般為管長的1/5（需根據試管的大小而定）.液體培養基如乳糖膽鹽發酵培養基約分裝10毫升左右.

（4）塞硅膠塞：裝好培養基的試管應塞上硅膠塞,松緊合適,緊貼管壁,不留縫隙,約1/2塞入內,這樣即可過濾空氣,避免雜菌侵入,又可減緩培養基水分的蒸發.

（5）包裝：三角瓶棉塞頭部應用錫箔紙包扎,試管集中于試管簍.

2、無菌水的制備：

（1）用10ml移液管量取9.2ml蒸餾水（稀釋水）裝入試管中.

（2）用100ml量筒量取95ml蒸餾水（稀釋水）裝入150ml的三角瓶中.可置少許玻璃珠于三角瓶內,防止暴沸.

（3）量取240ml蒸餾水（稀釋水）于250ml的三角瓶中,塞上瓶塞用牛皮紙包扎好,高壓滅菌備用.