培養細胞不貼壁的原因可能如下：
1.支原體污染.
2.培養瓶瓶底不干凈.
3.培養液pH 值過堿（NaHCO3 分解）.
4.消化液或培養液配制錯誤、過期儲存、儲存不當.
5.細胞老化（如傳代前細胞已匯合導致失去貼附性）.
6.接種細胞起始濃度太低或太高.
建議解決方法：
1.縮短胰蛋白酶消化時間或降低胰蛋白酶濃度.
2.分離培養物,檢測支原體.清潔支架和培養箱.如發現支原體污染,丟棄培養物.
3.注意刷洗,或換用一次性塑料培養瓶.
4.使用無菌醋酸溶液調整pH 值或充入無菌CO2（將培養液敞口放入培養箱也可）.
5.重新配置消化液或培養液.
6.啟用新的保種細胞.
7.調節最佳接種細胞濃度.