【摘要】 目的：研究階段式大鼠脾陽虛證模型的復制方法及客觀評價標準。方法：32 只 SPF 級雄性SD 大鼠隨機分為對照組和脾陽虛證模型組（模型組），每組 16 只。模型組大鼠采用兩段式造模方法；第1 階段，即前 15 d 施加飲食不節和力竭游泳刺激；第 2 階段，即后 7 d 每日早晚 2 次灌服番瀉葉。為質控造模過程，以臨床辨證要點為基礎，建立了大鼠脾氣虛和脾陽虛證的評價標準，并進行客觀評價。結果：與對照組比較，模型組大鼠在第 1 階段出現了消瘦、食少、神疲和乏力等癥狀，表明大鼠處于脾氣虛狀態；在第 2 階段，上述變化更加嚴重，且有畏寒、便溏等癥狀，提示大鼠處于脾陽虛狀態。結論：本研究中采用的兩段式造模方法和模型評價標準，能夠成功復制大鼠脾陽虛證模型。
【關鍵詞】 脾陽虛； 脾氣虛； 動物模型； 大鼠； 評價標準
脾陽虛證是中醫證候研究的重要內容，其大鼠模型的復制方法有單因素法和復合因素法，因后者更好地模擬了該證的病因病機，目前應用較多，但還存在一些急需解決的問題。首先是模型的局限性問題。因為脾陽虛證的病因病機復雜，難以全面模擬，所以現有模型實為有限模型，并不具備脾陽氣證的全部內涵，必須加以限定。其次是模型復制的質控問題。復合因素造模法多為兩段式，即先復制脾氣虛，再復制脾陽虛，而模型評價僅涉及脾陽虛，缺乏過程管理。為解決上述問題，本研究先后模擬脾氣虛證和脾陽虛證的主要病因病機，并建立了階段性評價標準以質控，成功復制了脾陽虛證的有限模型，特報道如下。
1 材料與方法
1.1 實驗動物與分組 32 只 SPF 級雄性 SD 大鼠，體質量（200±10）g，購于遼寧省本溪市實驗動物中心 [SCXK（遼）-2010-0001]，隨機分為對照組和脾陽虛證模型組（模型組），每組 16 只。大鼠飼養于遼寧中醫藥大學實驗動物中心 [SYXK（遼）-2013-000-9]，室溫 18~23 ℃，相對濕度 45%~55%，自由飲水進食，適應性飼養 1 周后，開始實驗。
1.2 模型復制方法 第 1 階段（phase 1， P1），按文獻 [12] 方法復制脾氣虛證模型（飲食失節＋勞倦型），即模型組大鼠在 15 d 內：（1）先飽食 1 d，再禁食 2 d，均不禁水，共 5 個循環；（2）每日水溫35~37 ℃游泳至力竭。第 2 階段（phase 2， P2），復制脾陽虛證模型（苦寒瀉下型），即每日灌服 20% 番瀉葉水浸劑（2 m L/100 g），早晚各 1 次，連續 7 d。
1.3 模型評價標準 以大鼠的生物學特征為基礎，根據臨床辨證要點，擬定脾氣虛證的評價標準：消瘦，食少，神疲，乏力；脾陽虛證模型評價標準：前述標準加畏寒、便溏。
1.4 模型評價方法 分別在 P1、P2，每組取 8 只大鼠進行評價。
1.4.1 代謝水平評價 上午 9~10 時測量其體質量以評價消瘦；測肛溫以評估畏寒；單只放入代謝籠24 h 后計算進食 / 水量，即投食 / 水量 - 剩余量，以評價食少；按文獻 [12] 方法收集糞便，檢測大便含水率，即（大便濕重 - 大便干重）/ 大便濕重×100%，觀察便溏情況。
1.4.2 神疲評價 采用Supermaze動物行為學實驗系統（上海欣軟信息科技有限公司
），按文獻 方法進行檢測，即將大鼠放入箱體中心，觀察 5 min 內大鼠的運動距離和站立次數，徹底清潔箱體后，檢測下一只大鼠。
1.4.3 乏力評價 采用 YLS-13A 大小鼠抓力測定儀（濟南益延科技發展有限公司）檢測前肢抓力。先用右手將大鼠按放在抓力板上，左手向前推抓力板，然后右手向后滑至鼠尾部，左手輕輕松開抓力板，待大鼠用力抓住抓力板時，及時加力后拉，以得到最大抓力。專人連續測量 3 次，取平均值。
1.5 統計學處理 采用 SPSS 17.0 統計學軟件對數據進行分析，計量資料以（x-±s）表示，比較采用單因素方差分析，以 P<0.05 為差異有統計學意義。