基因工程根瘤菌表達融合蛋白GSTHAL1條件的優化及耐鹽水平的提高

摘　要: 利用原核表達載體pGEX24T21構建重組質粒載體pGEX2HAL1,三親本雜交轉化根瘤菌,表達融合蛋白GST2HAL1。結果表明,與空白菌和未誘導工程根瘤菌相比,誘導后工程根瘤菌的耐鹽水平有明顯提高。通過檢測不同溫度、不同誘導時間和不同IPTG誘導濃度條件下融合蛋白的表達量,優化各個參數。在28℃的溫度條件下,融合蛋白GST2HAL1表達量明顯增加;在IPTG濃度為1. 0 mmol·L - 1 ,誘導時間為3 h的條件下,融合蛋白的表達量最高,培養基產生的融合蛋白為3. 02 mg·L - 1 ,占可溶性蛋白質的39. 34%。本研究對今后利用基因工程技術研制新型生物肥料做了有益的嘗試。