塞爾托利氏細胞之間的連接形成了血睪屏障,血睪屏障是一個結構分隔睪丸空隙血液區及精細管內的向管腔區。塞爾托利氏細胞控制養份、激素及其他化合物進出睪丸的細管,且令向管腔區成為高度免疫的位點。
它亦負責確立及維持精原細胞的干細胞利基,以確保精子的更新及精原細胞在精子生成的過程中逐步分裂為成熟的生殖細胞,而最終為放出精子。