實驗原理
血液中的中性粒細胞及單核細胞對細菌、異物等具有吞噬作用。在一定量的肝素抗凝血中,加入一定量的墨汁,經37℃溫育4小時,涂片染色后,在顯微鏡下觀察吞噬細胞對墨汁的吞噬情況,并計算吞噬率及吞噬指數,從而協助急性白血病的診斷與鑒別。
三、實驗方法
材料:
1.肝素抗凝劑配成6U/ml水溶液。
2.模式制備普通硯臺上加生理鹽水5ml,以優質中國塊墨或印度墨,以100r/min研磨3min。所得墨汁經普通濾紙過濾3次備用。
3.恒溫孵育箱、顯微鏡等。
方法:
1.取小試管1支,加肝素20μl,加耳垂血或指血100μl于試管中混勻。
2.加入過濾墨汁10μl,混勻,加塞。
3.置37℃溫育4小時,取出,推成血片,待干后,用瑞氏瑞氏鏡檢。
4.計數幼稚細胞或中性成熟粒細胞100個;計數單核細胞20個。計算吞噬率及吞噬指數。
四、實驗結果計算
1.根據細胞吞噬墨粒多少及大小,可定為下列程度:
(陰性)細胞內未吞噬墨粒
(+)細胞內含有小墨粒1~5個
(++)細胞內含有大小不同墨粒10個左右
(+++)細胞內含有大墨粒10個左右,小墨粒較多
(++++)細胞內含有多數大顆墨粒,并有塊狀、球狀,小墨粒很多,但細胞核清楚
2.成熟中性粒細胞吞噬率74%±15%,吞噬指數126±60;成熟單核細胞吞噬率95%±5%,吞噬指數313±86。
五、注意事項
肝素劑量對白細胞的吞噬功能有影響,肝素用量過大,細胞形態異常,吞噬率和吞噬指數降低;肝素用量過小,影響抗凝。肝素用量以每100μl血用0.3單位為好。
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