試驗原理
HLA-B27屬于1型MHC基因。基本上表達在機體所有有核細胞上，特別是淋巴細胞表面有豐富的含量。使用熒光定量標準微球，校正HLA-B27實驗條件后，測定樣本中T淋巴細胞HLA-B27表達水平。若HLA-B27表達水平大于標準微球設定MARK，則為陽性結果；若HLA-B27表達水平低于標準微球設定MARK，則為陰性結果。
實驗試劑
Anti-HLA-B27 Kit(美國BD Biosciences公司；CAT:340183)，
1、Anti-HLA-B27-FITC/CD3-PE
2、HLA-B27 Calibration beads
3、FACS Lysing Solution
實驗步驟
1、標本采集：使用EDTA-K2抗凝真空采血管，抽取靜脈血2ml。
2、染色和固定細胞：
（1） 標本管編號A，取一只流式專用管A1。
（2） A1管加入Anti-HLA-B27-FITC/CD3-PE 30ul。
（3） A1管中再加入全血50Ul，混均。
（4） 置室溫，避光孵育15min。
（5） 加入FACSLysing溶2.0ml，置室溫，避光孵育10min。
（6） 300g離心5min，棄上清液。
（7） PBS洗滌細胞兩次，300g離心5min，棄上清液。
（8） 1%多聚甲醛0.5mL。
3、上機檢測；分析結果；打印實驗報告。
臨床意義
HLA-B27抗原表達與強直性脊椎炎發病具有高度的疾病相關性。在強直性脊椎炎患者中，95%以上個體是HLA-B27抗原陽性；而在健康人群中HLA-B27抗原表達陽性者不足7%。HLA-B27陽性個體的該病相對危險率達300%以上。現今發現與HLA-B27高度相關的疾病主要有：強直性脊椎炎、萊特病（包括腹瀉、多發性關節炎、尿道炎的綜合癥）和急性葡膜炎。最近研究還認為與心肌炎等心臟病有關。
1、 先用HLA-B27標準微球校準，設定正確的“MARK”。
2、 收集T細胞太少（少于500個）、碎片污染太多（超過10%）、門中T淋巴細胞不純（小于90%）可能引起實驗結果不正確。
3、 整個實驗過程中注意避光、避免抗體、血液粘附于試管壁，否則細胞不能被染色或染色不充分，而影響檢驗結果。
4、 溶血時間不宜過長，否則會引進白細胞破碎