臨床上嗜酸性粒細胞增多見于:
過敏性疾病,如血管神經性水腫、哮喘、食物及藥物過敏、血清病、蕁麻疹、枯燥熱等。
寄生蟲病:常見于血絲蟲、鉤蟲、包囊蟲、肺吸蟲、蛔蟲、 呂弗 氏( Lofllers )綜合征、蟯蟲、旋毛蟲、瘧疾(偶見)及血吸蟲等。
皮膚病:如濕疹、剝脫性皮炎、天皰瘡、牛皮癬、瘧疾、 疥 、感染、猩紅熱早期等。
血液病:高嗜酸性粒細胞綜合癥、 CML 、嗜酸性粒細胞白血病、何杰金氏病(占 10% 病例)、嗜酸性肉芽腫、家族性嗜酸性細胞增多癥、熱帶嗜酸性細胞增多癥、甲狀腺癌及播散性結締組織病。
與化學藥物有關:鎳(致皮膚炎)、青霉素、 PAS 、苯、呋喃妥因、磺胺等。
③嗜堿性粒細胞:
在正常人血液中為數甚少,該細胞嗜堿性顆粒含大量組織胺及肝素類物質,臨床上主要因骨髓增殖性疾病常伴嗜堿性粒細胞增多如 CML 、 CML
嗜堿變、嗜堿性粒細胞白血病、 M 4EO
、真性紅細胞增多癥、骨髓纖維化等。此外,還可見于感染恢復期、甲狀腺功能低下、何杰金病、溶血性貧血、肝硬化、結核病、流感、腫瘤以及月經初潮等
.
④淋巴細胞: 淋巴細胞為免疫反應細胞,來源于骨髓淋巴干細胞,經胸腺素作用分化為 T 淋巴細胞,參與細胞免疫,另一類經骨髓而成為 B 淋巴細胞,產生免疫球蛋白,可作為體液免疫。
●
外周血內淋巴細胞可分為大、中、小淋巴細胞,其形態一般不難 辯認
,在臨床由于各種因素刺激出現異常淋巴細胞,常出現于病毒感染性疾病,如傳染性單核細胞增多癥、傳染性淋巴細胞增多癥,傳染性肝炎、水痘、風疹、流感、結核病、藥物過敏、慢性感染、放射病、應激狀態及免疫異常等。其胞體增大,比正常淋巴大一倍以上,核染色質疏松、增多,胞漿豐富或不規則、有很強嗜堿性呈深
蘭色 、不均勻不透明或有泡沫或深 蘭色 、周邊著色加深,可見 嗜 天青紅顆粒或空泡。按 Doney 氏類型 分三型:
Ⅰ型:最多見,胞體增大,核圓、卵圓或腎形,染色質疏松、粗糙,胞漿豐富、 深染 , 有泡沫或空泡,偶有嗜天青顆粒,核 / 漿約 1:1 。
Ⅱ型:胞體較大,主要胞 漿明顯 增多,且 不 規整(體如單核細胞),染色質較致密,不如Ⅰ型增多聚集,胞漿淡蘭染,少數有嗜天青顆粒或少許空泡,核 / 漿為 1:2 。
Ⅲ型:少見,大致與Ⅰ型相似。可有核仁。
此外 ,Tuck 細胞即刺激細胞也是一種異常淋巴細胞 , 其意義與上述異常淋巴細胞相同。
● 外周血中惡性淋巴細胞見于下列疾病:原幼淋巴細胞—見于 ALL 或淋巴瘤。骨髓瘤細胞—多發性骨髓瘤、淋 - 漿細胞—華氏巨球蛋白血癥、毛細胞—毛細胞白血病。
幼淋細胞(
Prolympho Cytic Cell ; PLC )屬于幼淋細胞白血病( Prolymph Cytic Lenkemia ; PLL
)的病理性細胞,介于 幼淋與成熟 淋巴細胞之間的特殊幼淋細胞,具有成熟的核染色質與核仁并存的發育失衡的異相為最突出的特征。
⑤單核細胞: 是血中吞噬性細胞,參與免疫作用,在新生兒出生后一周內,在外周血中單核細胞可高至 4.0 × 10 9 /L ,平時由于采血部位及時間不同也有差異。臨床上,單核細胞增多見于以下情況:
● 常見于細菌感染、結核、細菌性心內膜炎、布氏桿菌病、菌痢或感染性疾病恢復期。
● 寄生蟲病:瘧疾、錐蟲病、黑熱病、阿米巴肝膿腫等。
● 惡性疾病:慢性單核細胞白血病、慢性粒 - 單核細胞白血病( CMML )、 MDS 及惡性腫瘤。
(二)紅細胞形態學診斷技巧:
1 . RBC 的 Hb 、網織 RBC 、 MCV 、 MCH 、 MCHC 及 RBC 體積分布寬度( RDW )是判定貧血類型重要依據:
(1)Hb/RBC 比值:正常人: Hb/RBC 比值為 3gHb/L=100 萬 RBC/ μ L 即 3:1 。 AA 、溶血性貧血及繼發性貧血等屬此類。 >3:1 者即為大細胞高色素性貧血 ,<3:1 者為小細胞低色素性貧血 .
(2)
網織 RBC 是新生的 RBC ,可反映造血機能的好壞。正常情況下為 0.5~1.0%, 代償性反應者多 >5% 。其網織 RBC
內嗜堿性網織增多,代償性功能減低者,低于正常水平。多見于 AA ,但有不典型 AA ( 1/4 )患者可有網織 RBC 增高。網織 RBC 計數
1000 個 RBC 中有多少網織 RBC ,以其 % 數表示,是一個比值數,不是絕對值。精確應計算絕對值或用流式細胞儀計數更為確切。
(3)MCV 、 MCH 、 MCHC 反映 RBC 病理變化,可將貧血分為大細胞性貧血、正常細胞性貧血、小細胞低色素性貧血及單純小細胞性貧血(即小細胞性正常色素性貧血),其診斷標準及其病因見表 3 :
2
. RBC 形態學在檢驗中易被忽視, 觀察 RBC 形態 , 一般 以外周 血涂片較為可靠。 RBC 形態與排列(如重疊、 緡
錢狀)與涂片技術、涂片部位及厚薄有很大關系。這點在鏡檢時應予注意。即是合格涂片, RBC 形態依然與涂片部位及厚薄等多種因素有關:
—如取涂片中心區域, RBC 中心淡染,多 >1/3 細胞面積大小 ;
—取自涂片薄處或尾部, RBC 形態誤給人以“球形”,失去雙 凹 盤形,中心淡染消失,所謂類球形改變;
—取厚片 或制片干燥過慢, RBC 未攤開,收縮變形,甚至出現人工中心染色過淡等;
—取厚片 RBC 則重疊堆積,呈假“緡錢狀”,不便查清形態;
— 玻 片不清潔,油脂過多或骨髓脂肪過多,制片干燥不快, RBC 則會形成人工的中心淡染區或空白區。
3 . RBC 形態及其臨床意義:
● 正常紅細胞為直徑 7.2~ 7.6mm ,厚度 2mm 圓盤狀,兩面凹陷,中央較薄,著色較淺,在涂片中形態基本一致。
● 正常 RBC 在體內能經受通過微血管的嚴重變形而不受損害。在高度粘稠血液中的 RBC 變成橢圓形,紅細胞膜圍繞著所含 Hb 旋轉,像坦克的踏板( Tread )。脾臟可篩選缺乏彈性紅細胞、紅細胞異常變形或喪失彈性紅細胞,加強對這些紅細胞的清除。
● 在貧血或有關疾病時紅細胞可出現異常,往往一張較滿意的血片,觀察紅細胞形態,對貧血的性質確定和某些疾病的診斷有一定的幫助。
● 貧血在紅細胞形態 中主要表現個體及群體大小、形狀、血紅蛋白濃度的差異。
( 1 )大小不等 ( Anisocytosis )及形態異常( Poikilocytos|is ),由于骨髓紅系代償性增生旺盛,而產生大小不等的紅細胞及形態多樣化異常,常見有:
①紅細胞顯著大小不等及形態異常如梨形、鈴形、少數 卵 圓形,常見于嚴重性貧血(包括繼發性貧血)及溶血性貧血。
②紅細胞個體小,大小不等,一般形態異常及中心染色過淺,見于缺鐵貧、 VitB6 缺乏及慢性失血性貧血等。
③紅細胞個體小,大小不等,異形,中心染色過淺,出現靶形及小紅細胞,多為地中海貧血及某些 Hb 病。
④紅細胞個體普遍增大,并 呈大小 不等,色素濃染,無 中心淺染區 ,多為巨幼細胞性貧血。
(
2 )多嗜性紅細胞 (或網織紅細胞)( Polychro matcphiliomacrocyte , Reticalocyte
)為胞體較大的成熟紅細胞,由于胞漿含有核糖核酸( Cytoplamia-RNA ),淡灰 蘭色 ,若經 煌
焦油蘭染色即為網織紅細胞。根據細胞嗜酸性物質多少,按 Hielmyer 分類法:
0 型: 胎幼紅細胞 漿內嗜堿性網狀物質;
Ⅰ型:系卷絲狀網狀物質;
Ⅱ型:網眼狀物質;
Ⅲ型:不完全網眼狀物質;
Ⅳ型:整個網絲斑點殘體。
( 3 )點彩紅細胞 ( Basophilic Stipplins ):晚幼紅細胞胞漿及成熟紅細胞中出現大小不等、分布不均的嗜堿性點彩物質。在溶血性貧血、鉛中毒( 因鉛使 核苷酸酶受抑制和嘧啶與核苷酸酶缺乏患者增多)。
( 4 )豪周氏小體 ( Howell-Jolly Bodies ):在晚幼紅細胞漿內和成熟紅細胞內含單個或多個紫紅的包含物為核碎片或染色體殘留物。此物具有 DNA 物質,是嚴重溶血、 MDS 、脾切除后等出現。
(
5 )卡 玻 氏環 ( Cabos Ring ):在紅細胞內具有淡紫紅色的環形或 8 字形環狀物 . 曾被認為是核的殘余和一種 豪
周氏小體變種。但日前認為是人工造成的,是退變細胞中凝集和變性的蛋白質,也有認為含有組蛋白( Hisfone )和鐵( Feulgen
),相差鏡下則看不見 . 見于鉛中毒、溶貧、白血病、惡性瘧疾等。
4 .特異性紅細胞形態改變:
( 1
)刺( 棘 )狀細胞或鋸形細胞( Aca Ntbocyte , Burr Cells
):在血細胞表面呈不規則的、較多的刺狀突出,呈鋸齒狀或刺狀。加 EDTA-Na 2 更顯著。此細胞由膜 質改變
所致;見于吸收不良反應、肝病、脾切除后、 PK 缺乏性貧血、先天性缺乏β - 脂蛋白血癥。
( 2 )刺毛細胞( Echinocyte ):整個細胞表面有棘突狀突起,從皺 縐 圓盤形發展或皺縮球形,直至棘突消失,見于尿毒癥、 PK 缺乏癥、輸注低鉀庫血、胃癌、胃潰瘍出血等 .
(
3 )裂細胞( Schlzocyte ):為大小不等、形態不規則、呈盔形、帶刺、三角碎片 . 多由于微血管堵塞、管腔狹小,紅細胞可塑性降低,
RBC 通過時被擠壓或纖維切割所致 . 可見于微血管病性溶血、 DIC
、血栓性血小板減少性紫癜、溶血性尿毒性綜合癥、嚴重燒傷、心瓣膜溶血、行軍性 Hb 尿。
( 4 )靶形紅細胞(
Codocyte )(扁平紅細胞—墨西哥帽形細胞):此細胞比正常紅細胞薄,細胞表面積比其容積量相對較大。靶點( Hb 的中心點)和周圍 Hb
環缺乏 連接橋 . 這種細胞對滲透脆性試驗有較大抵抗性,能耐受比正常紅細胞更多的水分滲入,使其成為球形乃至最后溶血之前則容積增大 50%
,見于地中海性貧血、 Hb-S-C 病、脾切除后及阻塞性肝病。因卵磷脂膽固醇酰基轉移酶( LCAT )減少或缺乏,使血清中膽固醇與卵磷脂積聚 ,
影響了細胞膜的改變 而致靶形 細胞。
( 5 )淚滴紅細胞( Pacryocyte ):此細胞形如淚滴狀、網球拍形、長形或豆點狀 . 見于骨髓纖維化。
(
6 )球形紅細胞( Spherocyte ):此細胞胞體比正常的較小,濃染的圓球形,平均厚度增大( 厚徑 3.2mm ) , 直徑縮小 (
6.3mm ) , MCV 正常,中心淡染區消失,由于變形性差,故易發生溶血,正常人有 <5% 的球形細胞。見于遺傳性球形紅細胞(
>20% )、獲得性球形紅細胞增多癥(如 ABO 血型不合引起新生兒溶血性貧血)。
( 7 )橢圓形紅細胞(
Elliplocyte ):為卵圓形,如駱駝的紅細胞,此為紅細胞膜的缺陷。正常人 <1.5%
,貧血時可稍多。見于惡性貧血和其他巨幼細胞性貧血、嚴重缺鐵性貧血、地中海性貧血、重癥貧血、嚴重感染、腫瘤、白血病及骨髓纖維化患者。在遺傳性橢圓形紅細胞增多癥可
>70% ,此病為顯性遺傳,男女均可,同等遺傳,可能與 Rh 因子有關 . 未成熟的紅細胞仍為圓形,而無此種改變。在出生后第 3
個月始出現明顯異常。約 2% 受孕者有輕度溶血現象, Hb 多為正常(代償性)或減低(失代償性)。此種紅細胞在 37 ℃ 孵育 48
小時可發生自溶,加葡萄糖和 ATP 即可糾正。
( 8 )口形紅細胞( Stomatocyte
):此種紅細胞中央為中空裂隙,形如口形或橢圓形淡染區,又因該細胞內水分減少,故又稱為干細胞( Xerocyte )。在 37 ℃
自溶加重,但加葡萄糖癥狀減輕,細胞內 G6PD 和 PK 活性升高,但還原型谷胱甘肽濃度很低,過度失 K 和 Na
時異常增加。小量口形紅細胞增多見于:肝硬化、遺傳性球形紅細胞增多癥、輕型地中海貧血、鉛中毒、傳染性單核細胞增多癥、谷胱甘肽過氧化物酶缺乏,惡性腫瘤及酒精中毒等。明顯增多見于有溶血性貧血的口形紅細胞增多癥。
(
9 ) 鐮 形紅細胞( Drepanocyte ):由于 Hb-S 的聚合作用,在缺氧情況 下方致
紅細胞變成鐮刀狀、細長新月形、燕麥形等形狀。此種細胞被脾臟阻止破壞產生血管外溶血。多見于黑人 Hb-S 病, 鐮 變試驗是用還原劑偏重亞硫酸鈉(
具有奪氧作用 )處理后,造成紅細胞的 鐮 變更明顯。此為診斷 Hb-S 方法之一。
( 10 ) 緡 錢狀排列:紅細胞在有異常高分子蛋白環境中呈 緡 錢狀排列,多見于多發性骨髓瘤、華氏巨球蛋白血癥以及免疫球蛋白增多癥。
5 .外周血中出現有核(巨)紅(幼粒)細胞意義: 外周血中有核(巨)紅細胞的出現提示紅細胞成熟紊亂,是嚴重疾病的反應,見于:
(
1 )血片中有幼紅、幼粒細胞及點彩紅細胞, Howell-Jolly 小體出現,常見于:溶血性貧血、 PNH
、自家免疫性貧血、新生兒溶血性貧血( Rh 、 ABO 不和等)。嬰兒假白血病性貧血、巨幼細胞性貧血、紅細胞酶缺乏性貧血( PK 、 G6PD
)、 Hb 病、不穩定血紅蛋白以及極度貧血等。
( 2 )急慢性白血病、紅血病及紅白血病、 MDS 、骨髓纖維化以及其他一些骨髓增殖性疾病和真紅、血小板增多癥。
( 3 )晚期腫瘤反應及臨床危象反應。
以上異常紅細胞的臨床意義,必須結合臨床及其他檢查綜合分析。這些異常紅細胞只能作為陽性發現的一部分或者起向導作用,決不能單憑紅細胞異常的出現就武斷做診斷,因許多情況如技術原因(即人為的)造成假相是常有的。
(三)外周血血小板及巨核細胞形態學診斷技巧:
1
.血小板數 : 形態及聚集性 , 血涂片也是估計 Plt 計數主要依據。根據 RBC 正常值 500 萬 /ul:Plt 正常值 10 ~
20 萬 /ul=RBC:Plt=50:1(2) 個 , 一個油鏡視野 RBC 數約 RBC200 個: PLT4 ~ 8 個,計數 10 ~
20 個油鏡視野 Plt 數(分別計數正常和巨大異常 Plt 數)平均 每個油鏡視野 Plt 數如若 4 個相當于 10 萬 /ul ; 8
個相當 20 萬 /ul;2 個相當 5 萬 /ul;1 個 相當 2.5 萬 / ul 。由于巨大和異常的 PLT
自動化的儀器不能計數,造成誤差。
2
.血小板增多或減少或出現巨核細胞:見于原發性、特發性血小板增多癥、繼發性血小板增多癥(腫瘤或感染引起如腎衰、腎膿腫、脾切除后、肺癌等)、血小板增多的
MDS 、 5q — 綜合癥。血小板減少有 ITP (原發性)或繼發性血小板減少性紫癜及 MDS-
血小板減少癥及血小板無力癥。骨髓增殖性疾病( RBC 增多癥、骨髓纖維化、慢粒)。
七.外周血細胞形態學檢查步驟及注意事項和檢查報告書寫內容:
在鏡檢前先復習患者病歷資料及實驗室檢查結果,臨床診斷、送檢目的與要求,進行初步分析,考慮 須探索 問題,在觀察形態學過程時要思索這些問題。
( 一 ) :外周血涂片檢查步驟:
1 .肉眼觀察:涂片面膜大小、厚薄是否適中,染色好壞。
2 .低倍鏡觀察全貌:
( 1 )涂片及染色是否合適;
( 2 )了解白細胞數(可大體校對 WBC 直接計數是否正確);
( 3 )了解白細胞大致分布及其各階段大致比例,特別要注意由于涂片過力,把 WBC 及成熟粒細胞大多推于片尾部位,造成分類比值誤差。片尾有無異常細胞?
( 4 )選擇具有代表性的細胞鏡檢區域。
3 . 油鏡觀察 :進行 WBC 分類計數,觀察細胞形態、比例、有無巨大或異常細胞。
( 1 )血涂片對 WBC 總數準確性估計:從低倍及油鏡中估計 WBC 數及其 分布。一般區分 WBC 數幾個等級( 油鏡視野 中 WBC 密度、分散無重疊)。參見 WBC 形態診斷技巧節段。
( 2 )白細胞分類計數:血中主要兩大比例的中性成熟粒細胞與淋巴細胞及其他小比例細胞是否屬正常范圍及形態有無異常。
( 3 )注意片尾端有無巨大或出現不成熟或異常細胞(如中晚幼粒、中晚幼紅細胞、異常淋巴細胞、吞噬細胞、腫瘤細胞等);
( 4 )紅細胞形態(群體、個體)、排列(重疊、 緡 錢狀);
( 5 )血小板數量、形態及聚集性;
( 6 )異常細胞、寄生蟲。
(二)外周血涂片報告內容:
1.WBC 數及主要成分(即分類比例);
2. 分類細胞比例及形態是否正常;
3. 有無不成熟白細胞、有核紅細胞及異常細胞情況;
4. 成熟紅細胞形態(包括個體與群體、大小形態、異形)、色素狀態(中心淡染、低色素、高色素、多嗜性 RBC )核殘余物及排列等情況;
5. 血小板數量、形態、聚集性;
6. 異常細胞、寄生蟲。