熒光染料增殖試驗 CFSE檢測法
CFSE是一種可穿透細胞膜的熒光染料,具有細胞膜通透性,能夠自由進入細胞;當CFSE擴散穿過細胞膜,會與細胞內源酯酶產生水解反應而被激發,發出綠色熒光,這些帶熒光的CFSE會進一步與細胞骨架蛋白結合,形成穩定的胞內熒光蛋白。每當細胞進行分裂增殖,胞內熒光蛋白會被平均分配到下一代細胞中,因此細胞熒光強度會隨著增殖代數增加而不斷地降低(下圖6),可用流式細胞儀進一步偵測分析得出細胞分裂增殖的情況。CFSE的濃度,對于最終判斷細胞增殖結果有直接性的影響!

? 圖6
臺盼藍細胞計數 臺盼藍(Trypan Blue)計數法
臺盼藍(BI,貨號:03-102-1B)是一種藍色細胞活性染料,無法通過結構完整的細胞膜進入細胞內部;但細胞死后,喪失細胞膜穩定性,臺盼藍會進入細胞將細胞染成藍色,因此在細胞實驗中,被常規地搭配自動細胞計數儀或血球計數板,應用于區分辨活細胞和死細胞、及檢測細胞膜的完整性(如下圖7)。

? 圖7 THE END
當然,隨著科技的日新月異,會有越來越多更精確的實驗方法等著大家去學習研究。
您實驗室都在用什么方法測定細胞活性呢? 快在下面留言跟我們分享噢!
Reference
參考網站:http://tinyurl.com/yyhapr9x
Riss, Terry L., et al. "Cell viability assays." Assay Guidance Manual [Internet]. Eli Lilly & Company
and the National Center for Advancing Translational Sciences, 2016.
