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  • 發布時間:2019-09-13 14:28 原文鏈接: 多聚螯合物酶組化實驗

    • EPOS 法

    • EnVision 法

    • UIP 法

    • PowerVision 法

               

    實驗方法原理

    采用一種具有惰性的多聚化合物(葡聚糖)為骨架,將特異性抗體和 HRP 結合在一起,形成 HRP-多聚化合物-特異性抗體巨大復合物,該復合物內不含第二抗體及親和素。染色時,只需在組織切片上加入相應的酶標記特異性抗體 EPOS 試劑,孵育 30~60 min 即可完成。勿需再加酶標記第二抗體。

    實驗材料

    石蠟切片

    試劑、試劑盒

    蛋白酶 PBS 蒸餾水 H2O2 Dako EPOS HRP 試劑 DAB 樹膠 二甲苯 乙醇

    儀器、耗材

    滴管 玻片

    實驗步驟

    1. 石蠟切片常規脫蠟至水,PBS 洗 3 min×3 次。


    2. 蛋白酶消化或抗原修復(AR),PBS 洗 3 min×3 次。


    3. 0.3% 過氧過氫(H2O2)處理 5 min。


    4. 蒸餾水洗,置于 PBS 中洗 5 min。


    5. 加入相應的 Dako EPOS/HRP 試劑,室溫孵育 30~60 min。


    6. PBS 洗 3 min×3 次。


    7. 0.04% DAB- 0.03% H2O2 顯色 8~12 min。


    8. 水洗,復染,常規樹膠封片。

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