實驗方法原理
采用一種具有惰性的多聚化合物(葡聚糖)為骨架,將特異性抗體和 HRP 結合在一起,形成 HRP-多聚化合物-特異性抗體巨大復合物,該復合物內不含第二抗體及親和素。染色時,只需在組織切片上加入相應的酶標記特異性抗體 EPOS 試劑,孵育 30~60 min 即可完成。勿需再加酶標記第二抗體。
實驗材料 石蠟切片
試劑、試劑盒 蛋白酶PBS蒸餾水H2O2Dako EPOS HRP 試劑DAB樹膠二甲苯乙醇
儀器、耗材 滴管玻片
實驗步驟
1. 石蠟切片常規脫蠟至水,PBS 洗 3 min×3 次。
2. 蛋白酶消化或抗原修復(AR),PBS 洗 3 min×3 次。
3. 0.3% 過氧過氫(H2O2)處理 5 min。
4. 蒸餾水洗,置于 PBS 中洗 5 min。
5. 加入相應的 Dako EPOS/HRP 試劑,室溫孵育 30~60 min。
6. PBS 洗 3 min×3 次。
7. 0.04% DAB- 0.03% H2O2 顯色 8~12 min。
8. 水洗,復染,常規樹膠封片。