（2）來自永生化淋巴細胞株
1.增殖細胞，直至全培基到50mL。.
2.收獲細胞前的18?24h，更換新鮮培養液。
3.收獲時，將20mL生長良好的細胞移到50mL離心管中。
4.加200ΜL濃度為10μ×g/mL秋水酰胺，輕輕混勻。
5.37℃條件下孵育50?60min。
6.180g離心5min。箱或水浴箱)。
5.預熱Multiprobe?裝置，探針面朝上（即突出表面朝上，標記表面朝下），不要接觸突出方形塊的表面。
6.準備一個染色缸裝2×SSC，三個染色缸分別裝70%、85%和100%的乙醇系列。
7.用2×SSC洗點好樣的片子2min，然后依次在70%、85%和100%的乙醇中各脫水2min。
8.片子空氣干燥后，有樣品一面朝上的放在37℃加熱板上。
9.同時，用10斗移液器取2,預熱雜交液點到Multiprobe?裝置上的突出方形塊上（放置在37℃加熱塊上）。
10.小心翻轉片子（點樣品面朝下），使之與Multiprobe?裝置上相應的方塊接觸，組裝到Multiprobe?裝置上;也就是方塊1在Multiprobe?裝置的最右上角。
11.小心地提起組裝好的裝置，翻轉使片子在Multiprobe?裝置的下面。
12.放在37℃加熱板上10min。
13.將組裝好的裝置保持水平小心地轉移到75℃加熱板上。
14.變性1?3min，變性時間取決于固定的染色體懸液時間長短。
15.立即轉移組裝好的裝置到預熱的ChromoprobeMultiprobe?雜交室（或者避光塑料玻片盒）中，更換蓋子，然后在去蓋的水浴鍋中過夜。
二、
（4）雜交后洗脫和封片
1.將洗脫液I倒入干凈的染色缸中，水浴中預溫至72℃后，調整pH至7.0。
2.將洗脫液II倒入干凈的染色缸中，室溫（20?25℃)放置。
3.從雜交室中取出組裝好的Multiprobe?裝置。
4.小心卸下Multiprobe?裝置，立即將片子放在洗脫液I中2min，用鑷子
夾住片子，輕輕的上下振蕩。
5.轉移到洗脫液II中30s。
6.夾住片子的長邊，在紙上瀝去過量液體10?20s，但注意玻片表面不能干。
7.加20μL含DAPI的抗淬滅劑溶液到蓋玻片（24mm×60mm，試劑盒中提供）的兩端，輕輕地將片子上的雜交區域壓到蓋玻片上。
8.檢查復染的區域，用鈍頭鑷子輕輕按壓排掉氣泡。
9.將吸水紙蓋在標本上方，輕輕按壓以除去過量的液體。
10.將指甲油涂在蓋玻片周圍來封片。
11.觀察前至少在黑盒或玻片夾中放置至少10min以備閱片。
（5）熒光顯微鏡下分析雜交后的片子
1.將標本放在顯微鏡載物臺上。
2.使用10倍的物鏡和DAPI濾光片觀察第一方塊，觀察單個細胞的中期染色體。
3.加鏡油到方形塊，轉換成100倍的油鏡。
4.轉換到三通濾光片（DAPI/FITC/德克薩斯紅）觀察中期染色體。
5.計數綠色短臂信號和長臂紅色端粒信號，并記錄染色體的位置。第一方塊的正常實驗結果是1號染色體上有兩個綠色信號在短臂端粒區，兩個紅色信號在長臂端粒區。
6.分別用FITC濾光片或德克薩斯紅濾光片確認實驗結果。
7.重復步驟2?6,直到該孔中不同的5個中期分裂相均得到明確的結果。
8.每個孔的檢測都重復步驟2?7。
9.記錄分析結果，任何不正常的結果或者某些探針雜交結果不滿意時，應該用這些探針重做雜交實驗。
10.確認異常時采用患者的新鮮樣本，可能的話同時分析父母樣本，這樣將有助于判定異常是否是真異常（如果為真異常的話，確定是原發的還是家族遺傳的），還是良性多態變異的結果。