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  • 發布時間:2020-06-01 17:47 原文鏈接: 大鼠(GCSF)ELISA試劑盒技術原理

    大鼠(G-CSF)ELISA試劑盒技術原理

    樣本:    定血清、血漿、組織和相關液體
    適應物種:    Human、 Rat、Mouse 、Monkey、Rabbit
    應用:    生物科技
    檢測方法:    酶聯檢測/ELISA
    檢測限:    科研實驗
    供應商:    喬羽生物
    數量:    100
    規格:    96T/48T

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    產品名稱:大鼠(G-CSF)ELISA試劑盒技術原理
    英文名稱:Rat Granulocyte Colony Stimulating Factor,G-CSF ELISA Kit 
    產品編號:QY-SZ2078
    產品性狀:液體
    產品用途:科研實驗專用
    產品規格:96T/48T 
    客服電話:021-51867124 QQ:3063139112 郵件:3063139112@qq.com

    操作步驟:
    1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
    2.根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。
    3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
    4.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
    5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
    6.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
    7. 每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
    8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。

    9.在450nm波長處測定各孔的OD值。 需要而未提供的試劑和器材
    1. 標準規格酶標儀
    2. 高速離心機
    3. 電熱恒溫培養箱
    4. 干凈的試管和Eppendof管
    5. 系列可調節移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時,最好用多通道移液器
    6. 蒸餾水,容量瓶等

    計算
    以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。

    試劑盒性能
    1. 靈敏度:最小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。
    2. 特異性:不與人其它細胞因子反應。
    3. 重復性:板內、板間變異系數均小于10%。

    結 果 判 斷 與 分 析
    1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
    2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的HSP-70標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的HSP-70含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。


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