大鼠肌肝（Cr）酶聯免疫分析（ELISA）
試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。
藥品名稱：
通用名：大鼠肌肝（Cr）酶聯免疫分析試劑盒
使用目的：
本試劑盒用于測定大鼠血清，血漿及相關液體樣本中肌肝（Cr）含量。
實驗原理
本試劑盒應用間接法測定標本中大鼠肌肝（Cr）水平。用純化的大鼠肌肝（Cr）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入已知濃度的肌肝（Cr）標準品和未知濃度的肌肝（Cr）待檢樣品，溫育后，加入生物素標記的抗IgG抗體，再與鏈霉親和素-HRP結合，形成免疫復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的肌肝（Cr）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中大鼠肌肝（Cr）濃度。
試劑盒組成
1 | 20倍濃縮洗滌液 | 50ml×1瓶 | 9 | 標準品S1（48μmol/L） | 0.5ml×1瓶 |
2 | 鏈霉親和素-HRP | 6ml×1瓶 | 標準品S2（32μmol/L） | 0.5ml×1瓶 | |
3 | 酶標包被板 | 12孔×8條 | 標準品S3（16μmol/L） | 0.5ml×1瓶 | |
4 | 生物素標記的抗-IgG抗體 | 6ml×1瓶 | 標準品S4（8μmol/L） | 0.5ml×1瓶 | |
5 | 顯色劑A液 | 6ml×1瓶 | 標準品S5（4μmol/L） | 0.5ml×1瓶 | |
6 | 顯色劑B液 | 6ml×1/瓶 | 10 | 密封袋 | 1個 |
7 | 終止液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 3張 |
8 | 樣品稀釋液 | 6ml×1瓶 | 12 | 說明書 | 1份 |
標本要求
1．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
2．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融
操作步驟
1. 根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。
2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品，其余各步操作相同）、標準品孔、待測樣品孔。然后在標準品孔中加入標準品50μl，在樣本反應孔中先加入待測樣品10μl再加入樣品稀釋液40μl（樣品最終稀釋度為5倍），蓋上封板膜，輕輕振蕩混勻，37℃溫育45分鐘。
3. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
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