凍存細胞的復蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養基,然后加入完全生長培養基中。
直接鋪板方法
●取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化。
●直接用完全生長培養基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養基。進行活細胞計數,細胞接種應該至少在3×105活細胞/ml。
●培養細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養基,去除凍存劑。
離心方法
●取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化。
●把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養基,輕輕混勻。
●以大約80x g離心2到3分鐘。
●棄去上清。
●在完全生長培養基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數。
●細胞鋪板,細胞接種應該至少為3×105活細胞/ml。