如何做好肥達、外斐試驗

肥達反應(Widal test):

用已知傷寒、副傷寒沙門菌的O、H抗原，檢測受檢血清中有無相應抗體的半定量凝集試驗，稱肥達反應(Widal test)。本試驗與細菌分離培養同時進行或在前者失敗的情況下，能輔助診斷傷寒、甲、乙、丙型副傷寒沙門菌引起的腸熱癥。

外斐反應(Wiel-Felix):

斑疹傷寒等立克次體與變形桿菌某些X株的菌體抗原(OX_k、OX₁₉ 、OX₂抗原)具有共同的耐熱性多糖類屬抗原，常用后者代替相應的立克次體抗原進行非特異性凝集反應，這種交叉凝集試驗稱為外斐反應，用于立克次體病的輔助診斷。

傳統的肥達、外斐試驗采用試管法，存在試劑用量大、結果不易觀察等缺點，現介紹一種較實用的平板法，試劑用量僅為試管法1/2、結果易判定等優點。

試驗的第一步（準備）：

準備一塊U型反應板，長18厘米，寬9 厘米，每孔容積1 毫升，并在上面做出清晰標識。

試驗第二步（加樣）：

為方便說明加樣步驟,先看反應板示意圖：

第五排     ○   ○    ○    ○    ○     ○    ○     ○

第四排     ○   ○    ○    ○    ○     ○    ○     ○

第三排     ○   ○    ○    ○    ○     ○    ○     ○

第二排     ○   ○    ○    ○    ○     ○    ○     ○

第一排     ○   ○    ○    ○    ○     ○    ○     ○

（從底部算起）

 O    H    甲    乙    丙    OX_k   OX₁₉    OX₂  

操作步驟

試驗第三步：混勻

用平板混合器以不會導致微量反應板內容物濺出的強度（100轉/分）混合3分鐘。

試驗第四步：恒溫

放37℃度水浴箱恒溫24小時，放水浴箱時請用紙板或其它物品做必要遮擋，此步不可省略，否則，請看下圖：

這是遮蓋紙板收集到的水滴。若這些水滴至反應板內，看結果時就真是葫蘆僧亂判葫蘆案了。做任何試驗，細節真的很重要。

結果判定：

肥達反應臨床意義：

1、  一般O>1:80,H>1:160,甲、乙、丙>1:80才有臨床意義，或在疾病早期及中后期分別采集兩次血清，若第二份血清比第一份的效價高4倍以上增高具有診斷價值。

2、  O及甲、乙其中之一項或丙凝集效價增高時，可以診斷副傷寒甲、乙、丙的某一種。

3、  O抗原產生的抗體為lgM, 出現較早，存在于血清的時間較短，與相應的抗血清反應時呈顆粒狀凝集;H抗體為lgG, 出現較遲，持續存在的時間較長，與相應的抗血清呈絮狀反應。

4、  O高H不高：

a .疾病早期；

b.沙門菌屬中其它菌種感染引起的交叉反應；

c.H→O變異的沙門菌引起的感染。

建議一周后復查，如一周后H也有升高，可證實為腸熱癥。

5、  H高O不高：

a .可能為疾病的晚期；

b.以往患過傷寒、副傷寒或接受過預防接種；

c.回憶反應等。

外斐反應臨床意義：

1、  血清抗體效價達1：160以上有意義。病程中雙份或多份血清試驗，若效價有4倍以上增高具有診斷意義。