將細胞培養瓶豎立放置，吸走培養基，如果培養基中的脫落細胞較多，說明細胞現在很容易脫落，只要加入1ml的PBS+EDTA(0.02%)，來回輕微晃動培養瓶直到細胞完全脫落，加入10mlMEM，混勻，不能吹打，分裝2瓶。
如果細胞沒長滿就脫落，則只需加入5mlMEM，不分裝。如果培養瓶中的細胞貼壁較牢固，培養基上清沒有細胞脫落碎片，且細胞長滿達到80％以上，吸走培養基，加入5ml的PBS+EDTA(0.02%)，迅速輕微晃動，豎立培養瓶，吸走，加入1ml0.05%胰酶，37度消化不超過3min。
