在診斷方面應解決兩個問題，即疾病診斷與病因診斷。診斷宜早。因X線表現出現甚遲，所以不能以X線檢查結果作為診斷依據，對有條件者可爭取行MRI檢查。急性骨髓炎的診斷為綜合性診斷，凡有下列表現者均應想到有急性骨髓炎的可能：
1.急驟的高熱與毒血癥表現。
2.長骨干骺端疼痛劇烈而不愿活動肢體。
3.病變處有一個明顯的壓痛區。
4.白細胞計數和中性粒細胞比例增高并有核左移。
病因診斷在于獲得致病菌。血培養與分層穿刺液培養具有很大的價值。為了提高陽性率，需反復做血培養。
