根據女性有閉經-乳溢-不育、男性性功能減退或不育、血清PRL水平明顯升高、CT或MRI顯像有垂體瘤存在,可作出PRL瘤的診斷。應與下列疾病鑒別:垂體非PPL瘤、原發性甲狀腺功能減退癥、特發性高PRL血癥、下丘腦腫瘤、鞍區垂體外腫瘤、顱咽管瘤、生殖細胞瘤、腦膜瘤等。