激發光波長：在效果相同的情況下，光源容易得到。
發射光波長：在效果相同的情況下，波長容易檢測得到。
如果儀器沒有上述功能，一般可將儀器的激發波長(EX)先設定為200nm，然后進行發射波長(EM)模式掃描，(EM)波長范圍暫設定為210－800nm，然后記錄所有出現的峰值波長；改變激發波長(EX)后再掃描。
如第二次發射圖譜中的某個（或某些）峰的位置沒有位移（或位移很少），一般來說這個（或這些）峰就是熒光峰；因為熒光峰的位置是不隨激發波長的改變而改變的，僅是峰高（或峰面積）發生改變。
激光波長
對雜散光及信噪比的影響十分顯著，當狹縫寬度不變時，用氬激光514.5nm比用488.0nm波長激發樣品，雜散光要小一到二個數量級（±100cm-1范圍內），并且分辨率有所提高。這一方面是由于長波長激光對儀器內少量灰塵或試樣中缺陷的散射弱；另一方面由于狹縫寬度一樣時，不同波長的光由出射狹縫出射時所包含的譜帶寬度不一樣。
