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  • 發布時間:2021-05-29 21:31 原文鏈接: 定期進行支原體監測,避免細胞生長環境的污染

    支原體在光學顯微鏡下也無法看見,它被稱為小的細菌。但它沒有細胞壁,形態多樣。它可粘附在細胞表面,汲取細胞培養液和細胞內的各種營養,嚴重影響細胞代謝和基因表達。

    科研中細胞實驗是chang用的科研手段。由于支原體普遍為人體所攜帶,而且容易在空氣中形成氣溶膠,因此在細胞培養時,常規應至少一周檢測一次支原體。

    支原體檢測有多種方法,如PCR法(含實時熒光PCR技術)、恒溫擴增法、DNA染色法、培養法、支原體酶檢測法、ELISA法,以及細胞感應變色法等。

    這些方法各有長短,有的結果直觀,有的省時,有的精que,有的靈敏度高。因此,這些方法應取長補短。

    其中,設計較好的PCR方法能達到10CFU/ml的檢測限,靈敏度優于其他方法,故為藥廠所青睞。PCR方法還有內控對照,可反映檢測過程是否正常。同時,PCR方法能覆蓋上百種支原體物種,不容易有假陽性和假陰性,操作也較為省事,不用再去培養細胞,因而應用較為多見。

    有些PCR方法檢測限能達到20個基因組拷貝數/PCR反應,也相當靈敏。

    Robustness(穩定性或耐用性)也是方法評價的指標之一,可反映方法的可靠性和得出結果的穩定性。PCR方法也具有較好的穩定性,不受操作過程的因素波動。

    PCR檢測細胞上清中的支原體時,只需2ul就可檢測。如果是用于藥廠的放行檢測,則樣本需加10ul。


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